Anticorps monoclonal lapin anti-DDX4 (VASA) pour WB - Q9NQI0

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de DDX4

• DDX4 (protéine DEAD box 4), également connue sous le nom de VASA, est un membre de la famille des hélicases ARN DEAD-box, caractérisée par le motif conservé Asp-Glu-Ala-Asp (DEAD). Il fonctionne comme une hélicase ARN dépendante de l'ATP, essentielle pour le développement des cellules germinales (PubMed:10920202, PubMed:21034600). Références connexes : PMID:10920202, PMID:21034600
• Lors de la spermatogenèse, DDX4 est nécessaire pour réprimer les éléments transposables via la voie piRNA, maintenant ainsi l'intégrité du génome dans la lignée germinale (Par similitude). Cela implique la formation de complexes protéiques piRNA-Piwi et la médiation de la méthylation des transposons.
• DDX4 participe à la biogenèse secondaire des piRNA via un cycle d'amplification par ping-pong dans les cellules germinales mâles fœtales, et son activité hélicase permet le traitement des pré-piRNA en piRNA matures (Par similitude).
• La protéine contient plusieurs domaines : un cœur hélicase central avec une activité de liaison et d'hydrolyse de l'ATP, et possiblement des répétitions. Elle subit un épissage alternatif, générant des isoformes.
• DDX4 se localise principalement dans le cytoplasme, avec un enrichissement dans la région périnucléaire (Par similitude).
• L'expression tissulaire est restreinte à l'ovaire et au testicule, avec une expression dans les cellules germinales primordiales migratoires de la crête génitale (Par similitude).
• Les mots-clés incluent protéine de développement, différenciation, méiose, spermatogenèse et silenciage génique médié par l'ARN, reflétant ses rôles critiques dans la biologie des cellules germinales.
• Il existe des preuves de phosphorylation comme modification post-traductionnelle (à partir du mot-clé Phosphoprotéine d'UniProt).

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 635 à 724 près de l'extrémité C-terminale de la DDX4 humaine (NP_077726.1). Cette région est probablement spécifique à la DDX4 humaine, mais la réactivité croisée avec la souris et le rat a été confirmée. Lors de l'évaluation de la spécificité, envisagez un alignement des séquences entre espèces.
• Cet anticorps monoclonal de lapin convient à plusieurs applications : Western blot (WB) détectant une bande à ~79 kDa, immunoprécipitation (IP), immunofluorescence sur tissus inclus en paraffine (IF-P), immunohistochimie sur coupes en paraffine (IHC-P) et ELISA. Comme pour tout anticorps, l'optimisation de la dilution et des conditions est recommandée.
• Pour les études impliquant une expression spécifique aux cellules germinales, l'anticorps peut être testé à l'aide de lysats ou de sections tissulaires ovariens ou testiculaires. Compte tenu de l'expression restreinte, des témoins négatifs appropriés doivent être inclus.

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