Anticorps polyclonal de lapin anti-DDX21 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q9NR30

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de DDX21

• DDX21, également connue sous les noms d'hélicase 2 de l'ARN nucléolaire, Gu-alpha et protéine 21 à boîte DEAD, appartient à la famille des hélicases de l'ARN à boîte DEAD, avec un poids moléculaire prédit d'environ 87 kDa (UniProt : Q9NR30).
• Dans le nucléole, DDX21 se localise aux loci de l'ADN ribosomique et se lie directement aux ARNr et aux petits ARN nucléolaires (snoARN), favorisant la transcription, la maturation et la 2'-O-méthylation des ARNr en facilitant le recrutement des snoARN. Références associées : PMID:25470060 , PMID:25477391
• Dans le nucléoplasme, DDX21 se lie à l'ARN 7SK et est recrutée au niveau des promoteurs de gènes transcrits par l'ARN polymérase II, où elle facilite la libération de P-TEFb du complexe inhibiteur 7SK snRNP de manière dépendante de l'activité hélicase, améliorant ainsi la transcription. Références associées : PMID:25470060
• DDX21 agit comme cofacteur transcriptionnel de JUN et est nécessaire à la phosphorylation de JUN au niveau de Ser-77. Références associées : PMID:11823437 , PMID:25260534
• La protéine présente une activité hélicase de l'ARN dépendante de l'ATP (déroulement de l'ARN double brin) ainsi qu'une activité de repliement de l'ARN (introduction d'une structure secondaire dans l'ARN simple brin). Références associées : PMID:9461305
• La désacétylation par SIRT7 active la fonction hélicase de DDX21, lui permettant de surmonter le blocage de l'ARN polymérase médié par les boucles R et de prévenir les dommages à l'ADN associés à la transcription. Références associées : PMID:28790157
• DDX21 est un composant d'un complexe cytoplasmique multi-hélicase-TICAM1 qui détecte l'ARN viral double brin, contribuant ainsi à l'immunité innée antivirale.
• Au niveau subcellulaire, DDX21 est principalement nucléolaire et nucléoplasmique, mais peut également se localiser dans le cytoplasme, le cytosol et les mitochondries dans certaines conditions.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 1 à 180 près de l'extrémité N-terminale de DDX21. Comme il s'agit d'un anticorps polyclonal de lapin généré contre une protéine de fusion recombinante, il peut reconnaître plusieurs épitopes au sein de cette région.
• Pour le western blot (WB) dans des conditions dénaturantes, une bande correspondant à la protéine pleine longueur d'environ 87 kDa est attendue. Des lysats de lignées cellulaires humaines ou murines dont l'expression de DDX21 est confirmée doivent être utilisés comme contrôles positifs.
• La localisation principalement nucléolaire et nucléoplasmique de DDX21 la rend adaptée à l'immunofluorescence (IF/ICC) et à l'immunohistochimie (IHC-P). Un enrichissement nucléaire et un marquage ponctiforme nucléolaire peuvent être observés ; l'inclusion de marqueurs appropriés des organites est recommandée pour vérification.
• Compte tenu de la nature de DDX21, qui se lie largement à l'ARN et possède plusieurs domaines, les performances de l'anticorps peuvent varier selon les protocoles de fixation, de perméabilisation et de récupération antigénique. Il est conseillé d'optimiser ces paramètres pour le type spécifique de cellule ou de tissu.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection après une titration standard afin de déterminer les concentrations de travail optimales.

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