Anticorps polyclonal de lapin anti-DDX11 pour WB, ELISA - Q96FC9

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'hélicase ADN-dépendante à l'ATP DDX11

• DDX11 est une hélicase ADN-dépendante à l'ATP qui déroule l'ADN dans le sens 5' vers 3', nécessitant une queue simple brin 5' minimale (15 nt pour les volets, 10 nt pour les substrats à brèche) pour le chargement et la translocation. Elle peut déplacer des régions duplex jusqu'à 100 pb, extensibles à 500 pb par RPA ou Ctf18-RFC. Références connexes : PMID:10648783, PMID:21854770, PMID:23797032, PMID:18499658, PMID:22102414
• Elle participe à la réparation des cassures double brin de l'ADN aux fourches de réplication, stimule l'activité de l'endonucléase à volet FEN1 pour traiter les fragments d'Okazaki et s'associe à la chromatine dans les régions en réplication. Références connexes : PMID:23797032, PMID:18499658, PMID:27477908
• DDX11 coopère avec TIMELESS pour préserver la progression des fourches de réplication sous stress et réguler la cohésion des chromatides sœurs et la ségrégation des chromosomes mitotiques. Références connexes : PMID:26503245, PMID:17105772, PMID:18499658, PMID:20124417
• Sa fonction aux fourches de réplication est modulée par le lncRNA DDX11-AS1/CONCR, qui améliore l'activité ATPase et la liaison à l'ADN. Références connexes : PMID:27477908
• DDX11 contribue à l'organisation de l'hétérochromatine et active la transcription de l'ARNr en recrutant UBTF et l'ARN polymérase I aux locus d'ADNr hypométhylés. Références connexes : PMID:21854770, PMID:26089203
• La protéine se localise dans le noyau, le nucléole, les pôles du fuseau et le corps intermédiaire. Elle est fortement exprimée dans la rate, le thymus, les testicules et les cellules de mélanome, mais pas dans les mélanocytes normaux, et soutient la prolifération des cellules de mélanome. Références connexes : PMID:23116066, PMID:9013641
• DDX11 est une phosphoprotéine qui coordonne les clusters fer-soufre (4Fe-4S) et contient des motifs de liaison à l'ATP et aux acides nucléiques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour la détection par Western blot de la DDX11 endogène (~108 kDa), envisagez d'utiliser des lysats cellulaires totaux de lignées cellulaires à forte expression (par exemple, des lignées de mélanome) et assurez-vous d'une séparation adéquate sur gel pour les grandes protéines.
• Validez la spécificité de l'anticorps en incluant des témoins positifs et négatifs appropriés, car les anticorps polyclonaux peuvent présenter des variations dépendantes des lots.
• En ELISA, l'immunogène recombinant (acides aminés 1–220 en N-terminal) peut servir de témoin positif ou d'antigène de revêtement ; titrez les concentrations d'anticorps pour des rapports signal/bruit optimaux.
• Compte tenu de la réactivité de l'anticorps avec la DDX11 humaine, la réactivité croisée avec des orthologues ou des isoformes doit être confirmée expérimentalement s'il est utilisé dans d'autres espèces.

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