Anticorps Polyclonal Anti-DDOST pour WB, IHC-P, ELISA - P39656

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de DDOST

• Identité protéique et isoformes : DDOST code pour la sous-unité de 48 kDa de la dolichyl-diphosphooligosaccharide-protéine glycosyltransférase, également désignée OST48, WBP1, AGER1 et CDG1R. L'épissage alternatif produit plusieurs isoformes.
• Fonction principale de glycosylation : La protéine est une sous-unité essentielle du complexe oligosaccharyl transférase (OST), qui catalyse le transfert en bloc d'un glycanne préassemblé à haute teneur en mannose (Glc3Man9GlcNAc2) du dolichol-pyrophosphate vers les résidus asparagine des polypeptides naissants dans le RE (PubMed:31831667).
  Références associées :
  PMID:31831667
• Mécanisme co-traductionnel : L'activité OST est couplée à la translocation des protéines via le translocon Sec61, permettant à la N-glycosylation de se produire co-traductionnellement du côté luminal de la membrane du réticulum endoplasmique.
• Assemblage du complexe OST : DDOST est requis pour l'assemblage des complexes OST contenant STT3A et STT3B, qui médient respectivement la glycosylation co- et post-traductionnelle (PubMed:22467853).
  Références associées :
  PMID:22467853
• Localisation subcellulaire : La protéine est un composant membranaire intégral du réticulum endoplasmique, avec un peptide signal et plusieurs domaines transmembranaires.
• Pertinence clinique : Les mutations de DDOST sont associées à des troubles congénitaux de la glycosylation, ce qui souligne son importance pour la santé et la pathologie humaines.
• Poids moléculaire : Le polypeptide canonique de DDOST a une masse moléculaire calculée d'environ 50,8 kDa (UniProt), tandis que la protéine mature migre aux alentours de 51 kDa sur SDS-PAGE.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (protéine recombinante couvrant les acides aminés 40–300) correspond au domaine luminal du DDOST humain, générant probablement des anticorps qui reconnaissent à la fois les épitopes natifs et dénaturés. Pour le WB, des conditions dénaturantes et réductrices sont appropriées.
• Lors de la réalisation d'IHC-P, la récupération d'antigène par traitement thermique ou enzymatique peut améliorer la détection ; il est recommandé d'inclure un tissu contrôle positif connu tel que le foie ou le pancréas.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour la détection directe ou par capture du DDOST recombinant ou endogène dans les lysats cellulaires et tissulaires. Une réactivité croisée avec le DDOST de souris et de rat a été rapportée, donc des expériences de titration sont conseillées pour chaque espèce.
• L'optimisation du signal peut nécessiter la détermination empirique de la dilution de l'anticorps. Commencez avec 1:500–1:2000 pour le WB et 1:200 pour l'IHC-P, puis ajustez selon les besoins.
• DDOST étant une protéine du réticulum endoplasmique exprimée de manière ubiquitaire, elle peut servir de contrôle de chargement ou d'étalon de référence pour les études de glycosylation.

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