Anticorps polyclonal de lapin anti-DCAF7 pour WB, IF/ICC, ELISA - P61962

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de DCAF7

• DCAF7, également connu sous le nom de WDR68 ou AN11, est une protéine conservée contenant des répétitions WD qui agit comme récepteur de substrat dans le complexe ubiquitine ligase E3 CUL4-DDB1, ciblant potentiellement des protéines spécifiques pour leur ubiquitination.
• Il joue un rôle essentiel dans le développement craniofacial, agissant en amont de la voie EDN1 pour réguler la formation de l'équivalent de la mâchoire supérieure.
• DCAF7 s'associe à DIAPH1 et module l'activité transcriptionnelle de GLI1, le liant à la signalisation Hedgehog et à la différenciation cellulaire.
• La protéine est impliquée dans le développement cutané normal et pathologique, bien que les mécanismes exacts restent à l'étude.
• Au niveau sous-cellulaire, DCAF7 se localise à la fois dans le cytoplasme et le noyau, ce qui est cohérent avec ses rôles dans la transduction du signal et la régulation de la transcription nucléaire.
• L'épissage alternatif produit plusieurs isoformes, suggérant des fonctions spécifiques aux tissus ou au contexte cellulaire.
• Les mots-clés d'UniProt incluent protéine développementale, voie de conjugaison Ubl et répétition WD, soulignant son implication dans la dégradation des protéines et les processus développementaux.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est une protéine de fusion recombinante englobant la forme entière de la DCAF7 humaine (acides aminés 1-342). Cette conception suggère que l'anticorps peut reconnaître plusieurs épitopes, offrant une détection robuste.
• Pour le Western blot, DCAF7 migre à environ 39 kDa. Utilisez des contrôles positifs appropriés tels que des lysats de cellules HeLa ou HEK293, et validez sur des échantillons humains et murins en raison de la réactivité croisée confirmée.
• En immunofluorescence/ICC, optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation ; envisagez d'utiliser du PFA à 4 % suivi de Triton X-100 à 0,1 %. La localisation duale cytoplasmique et nucléaire de la protéine peut être observée.
• Pour les applications ELISA, utilisez l'immunogène recombinant comme étalon ou des lysats cellulaires ; assurez-vous de titrer la concentration de l'anticorps pour obtenir un rapport signal/bruit optimal.
• Compte tenu de la nature polyclonale de l'anticorps, confirmez sa spécificité avec des contrôles appropriés, notamment des lysats de knock-down ou de knock-out si disponibles, et notez que la cohérence d'un lot à l'autre doit être surveillée.

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