Anticorps monoclonal de lapin anti-DBH pour WB, IP, IF, IHC-P, ELISA - P09172

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la dopamine bêta-hydroxylase

• La dopamine bêta-hydroxylase (DBH), également connue sous le nom de dopamine bêta-monooxygénase, est une monooxygénase contenant du cuivre qui catalyse l'hydroxylation de la dopamine en noradrénaline, une étape critique dans la biosynthèse des neurotransmetteurs catécholaminergiques.
• L'enzyme est localisée dans la lumière des vésicules sécrétrices, y compris les granules chromaffines de la médullosurrénale et les vésicules à cœur dense des neurones sympathiques, et peut également être sécrétée dans l'espace extracellulaire.
• La DBH existe sous forme de glycoprotéine tétramérique avec des liaisons disulfure intermoléculaires, contribuant à sa stabilité structurelle et à sa fonction enzymatique.
• Elle nécessite des ions cuivre et de l'ascorbate (vitamine C) comme cofacteurs pour une pleine activité catalytique, reliant sa fonction à l'homéostasie redox et métallique cellulaire.
• Les mutations du gène DBH sont associées à un déficit en dopamine bêta-hydroxylase, une maladie autosomique récessive rare caractérisée par une hypotension orthostatique, un ptosis et une déficience en noradrénaline.
• La protéine a un poids moléculaire prédit d'environ 69 kDa, avec des modifications post-traductionnelles étendues, notamment une glycosylation N-liée.
• La DBH est ancrée aux membranes des vésicules sécrétrices via un segment transmembranaire signal-ancre, la majeure partie de la protéine, y compris le domaine catalytique, faisant face à la lumière de la vésicule.
• Les mots-clés d'UniProt incluent structure 3D, biosynthèse des catécholamines, cuivre, variant pathologique, glycoprotéine et sécrétée, soulignant ses rôles multifacettes en neurobiologie et dans les maladies humaines.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 388-617 de la DBH humaine, une région prédite comme faisant partie du domaine catalytique ; par conséquent, l'anticorps est susceptible de reconnaître la forme mature et active de la protéine.
• Pour le transfert Western (WB), envisagez d'optimiser la préparation des échantillons en utilisant des conditions réductrices et dénaturantes, et anticipez une bande autour de 69 kDa dans les lysats cellulaires ou les extraits de tissu surrénalien.
• Cet anticorps est adapté à de multiples applications, y compris l'immunoprécipitation (IP), l'immunofluorescence (IF/ICC et IF-P) et l'immunohistochimie (IHC-P) ; validez les dilutions d'anticorps de manière empirique dans le système d'échantillon pertinent.
• Étant donné la réactivité croisée avec la DBH de souris, l'anticorps peut être utilisé dans des modèles murins transgéniques ou knock-out pour confirmer la spécificité ; utilisez des tissus témoins positifs et négatifs appropriés.
• Pour l'ELISA, envisagez un enrobage avec la protéine DBH recombinante ou l'utilisation d'un format sandwich avec une paire d'anticorps de capture/détection pour améliorer la sensibilité et la plage dynamique.

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