Anticorps polyclonal Anti-DAPP1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q9UN19

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de DAPP1

• DAPP1 (également connu sous le nom de BAM32) est une protéine adaptatrice des lymphocytes B d'environ 32 kDa.
• Il fonctionne comme un adaptateur double pour la phosphotyrosine et les 3-phosphoinositides, reliant la signalisation du récepteur des antigènes des cellules B (BCR) aux voies de signalisation en aval de la phosphoinositide 3-kinase (PI3K).
• La protéine contient un domaine SH2 et un domaine d'homologie à la pleckstrine (PH), permettant le recrutement membranaire et l'interaction protéique.
• DAPP1 est principalement localisé dans le cytoplasme et peut s'associer à la membrane plasmique lors de l'activation.
• L'expression tissulaire est la plus élevée dans le placenta et les poumons, avec des niveaux plus faibles dans le cerveau, le cœur, le rein, le foie, le pancréas et le muscle squelettique.
• Il est spécifiquement exprimé dans les lymphocytes B et n'est pas détecté dans les lymphocytes T ou les cellules non hématopoïétiques.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation, cohérentes avec son rôle dans la signalisation.
• L'épissage alternatif génère plusieurs variantes de transcription, modulant potentiellement sa diversité fonctionnelle.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 100 à 273, une région centrale de DAPP1 ; cette conception peut améliorer la détection de DAPP1 pleine longueur tout en nécessitant une validation pour la spécificité des isoformes.
• Pour le Western blotting, DAPP1 est une protéine cytoplasmique et associée à la membrane ; utilisez des tampons de lyse appropriés et envisagez une centrifugation à faible vitesse pour conserver les fractions membranaires.
• En immunofluorescence, la localisation membranaire peut dépendre du stimulus ; les conditions de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées pour visualiser les pools cytoplasmiques et membranaires.
• Pour l'ELISA, l'immunogène peptidique peut servir de témoin positif ; cependant, un titrage et des tests de réactivité croisée contre des protéines similaires aux domaines SH2/PH sont conseillés.
• L'expression de DAPP1 est spécifique aux cellules B ; validez les performances de l'anticorps dans les lignées de lymphocytes B (par exemple, Ramos, Raji) plutôt que dans les lignées de cellules T pour confirmer la spécificité.

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