Anticorps polyclonal de lapin anti-DAPK3 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - O43293

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de DAPK3

• DAPK3 (protéine kinase 3 associée à la mort), également connue sous le nom de ZIPK ou Dlk, est une sérine/thréonine kinase qui joue un rôle central dans la régulation de l'apoptose, de l'autophagie, de la transcription, de la traduction et de la dynamique du cytosquelette d'actine.
• Par phosphorylation des chaînes légères de myosine (MYL12B, MYL9) et de la sous-unité cible de la phosphatase de myosine (PPP1R12A), DAPK3 module la contraction du muscle lisse et l'organisation des fibres de stress d'actine dans les cellules non musculaires.
• La kinase participe aux voies de mort cellulaire dépendantes des caspases (type I) et indépendantes des caspases (type II), et sa surexpression peut entraîner l'apoptose ou la mort cellulaire autophagique selon le contexte cellulaire.
• DAPK3 se localise dans plusieurs compartiments sous-cellulaires, notamment le noyau, les corps PML, les centrosomes, les centromères, le fuseau, le corps intermédiaire et le cytosquelette d'actine, ce qui reflète ses rôles fonctionnels diversifiés.
• Il régule positivement la signalisation canonique Wnt/β-caténine par interaction avec NLK et TCF7L2, et améliore la transcription médiée par le récepteur des androgènes, le liant ainsi aux voies de développement et hormonales.
• Sous stimulation par l'interféron-gamma, DAPK3 phosphorylate la protéine ribosomique RPL13A, favorisant sa libération des ribosomes et son engagement dans le complexe GAIT pour inhiber la traduction de transcrits spécifiques.
• La protéine est largement exprimée dans les tissus, les isoformes 1 et 2 étant notamment présentes dans le muscle lisse de la vessie, et est classée comme un suppresseur de tumeur potentiel.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (acides aminés 1-100) de DAPK3 humain ; par conséquent, l'anticorps est censé reconnaître des épitopes au sein de ce domaine.
• Une bande d'environ 53 kDa devrait être observée par Western blot, ce qui correspond au poids moléculaire prédit de DAPK3. Vérifiez la détection dans des lysats de lignées cellulaires ou de tissus appropriés exprimant la cible.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P) et l'immunocytochimie (IF/ICC), les conditions de fixation et de récupération de l'antigène peuvent influencer la coloration ; titrez l'anticorps et incluez des témoins appropriés (par exemple, des échantillons knockdown ou knockout) pour confirmer la spécificité.
• Il est rapporté que l'anticorps réagit de manière croisée avec DAPK3 de souris et de rat, probablement en raison de la conservation de la séquence dans la région de l'immunogène ; cependant, les utilisateurs doivent valider la réactivité dans leurs systèmes expérimentaux spécifiques.
• En tant qu'anticorps polyclonal, une variabilité d'un lot à l'autre peut se produire. Il est conseillé de titrer chaque nouveau lot et d'envisager l'utilisation de peptides bloquants pour les essais de compétition si une liaison non spécifique est suspectée.

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