Anticorps polyclonal anti-DAP Kinase 1 (DAPK1) pour WB, IHC-P, ELISA - P53355

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la DAP Kinase 1 (DAPK1)

• DAPK1 est une sérine/thréonine kinase dépendante du calcium/calmoduline qui intègre de multiples voies de signalisation cellulaire, régulant la survie cellulaire, l'apoptose et l'autophagie.
• Elle régule à la fois la mort apoptotique de type I dépendante des caspases et la mort cellulaire autophagique de type II indépendante des caspases, en fonction du contexte cellulaire.
• DAPK1 phosphoryle un large éventail de substrats, notamment PIN1, TPM1, STX1A, PRKD1, BECN1, TSC2, RPS6, MYL9 et DAPK3, modulant la localisation nucléaire, la dynamique du cytosquelette, le trafic vésiculaire et la signalisation métabolique.
• Dans l'AVC, DAPK1 agit comme un amplificateur de la signalisation des récepteurs NMDA, phosphorylant GRINB sur la sérine 1303 pour induire un influx nocif de Ca2+ et la mort neuronale irréversible.
• L'isoforme 2, générée par épissage alternatif, ne peut pas induire l'apoptose mais favorise la formation de blebs membranaires ; elle est exprimée dans le tissu intestinal normal et les carcinomes colorectaux.
• La localisation subcellulaire est majoritairement cytoplasmique et associée au cytosquelette, ce qui est cohérent avec ses rôles dans le remodelage et la signalisation.
• La protéine présente une architecture à domaines multiples comprenant un domaine kinase, un domaine de liaison à la calmoduline, des répétitions ankyrine et un domaine de mort, qui sous-tend sa fonction dans la régulation de la mort cellulaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le WB, une bande spécifique d'environ 160 kDa est attendue dans les lysats d'échantillons humains, de souris ou de rat ; confirmez la spécificité à l'aide de contrôles positifs et négatifs appropriés.
• En IHC-P, optimisez la récupération d'antigène et la dilution de l'anticorps ; tenez compte des profils d'expression connus (par exemple, cerveau, épithélium intestinal) pour la validation.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; la détermination empirique de la concentration de revêtement et des partenaires d'appariement est recommandée.
• Étant donné que l'immunogène est situé dans la région C-terminale (aa 1141-1430), vérifiez la détection de l'isoforme 2 dans les systèmes expérimentaux concernés si nécessaire.

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