Anticorps polyclonal anti-DAG1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q14118

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du DAG1

• La dystroglycane 1 (DAG1) est un composant central du complexe dystrophine–glycoprotéine, reliant la matrice extracellulaire au cytosquelette intracellulaire. Elle est exprimée sous forme de précurseur qui subit un clivage autocatalytique en alpha‑dystroglycane périphérique et bêta‑dystroglycane transmembranaire.
• Le complexe de la dystroglycane participe au dépôt de laminine et à l'assemblage de la matrice extracellulaire, au regroupement des récepteurs de l'acétylcholine à la jonction neuromusculaire, à la stabilité du sarcolemme, à la survie cellulaire, à la myélinisation des nerfs périphériques, à la migration cellulaire, à la polarisation épithéliale et à la morphogenèse de branchement épithélial.
• L'alpha‑dystroglycane se lie aux protéines de la matrice extracellulaire contenant le domaine G de la laminine (par exemple, laminine‑1/‑2, agrine, perlecane) et médie la signalisation via les voies PI3K/AKT et Src‑kinase, régulant ainsi les signaux apoptotiques et l'organisation synaptique.
• La bêta‑dystroglycane s'ancrer à la dystrophine (DMD) ou à l'utrophine (UTRN) et sert d'échafaudage pour l'axine au cytosquelette d'actine, facilitant la signalisation médiée par l'adhésion cellulaire et la polarité cellulaire.
• Dans le cartilage, le DAG1 se lie à l'agrine et régule à la hausse le facteur de transcription chondrogénique SOX9, régulant positivement la formation du cartilage.
  Références connexes : PMID:26290588
• La protéine se localise dans plusieurs compartiments : le sarcolemme et la membrane postsynaptique, les sites synaptiques, la membrane basale, l'espace extracellulaire, le cytoplasme/cytosquelette et le nucléoplasme.
• Le DAG1 agit comme un récepteur de la cellule hôte pour les arénavirus du nouveau monde de classe C (Lassa, virus de la chorioméningite lymphocytaire) et pour l'entrée de Mycobacterium leprae dans les cellules de Schwann.
  Références connexes : PMID:16254364, PMID:17360738, PMID:19324387, PMID:9851927
• Exprimé dans une variété de tissus fœtaux et adultes, avec une localisation prédominante à la membrane basale de l'épiderme et une expression dans les kératinocytes et les fibroblastes.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène (aa 654–749) réside dans la partie C‑terminale de la bêta‑dystroglycane ; l'anticorps est censé reconnaître à la fois le précurseur de longueur complète d'environ 97 kDa et la sous-unité bêta clivée (~43 kDa) dans les Western blots dénaturants/réducteurs.
• Pour le Western blot, validez le motif de bandes observé dans des tissus/lignées cellulaires positifs connus (par exemple, muscle squelettique, cerveau) et envisagez d'utiliser des lysats frais inhibés par des protéases pour éviter la dégradation.
• En immunofluorescence/ICC, la perméabilisation est nécessaire pour accéder à l'épitope intracellulaire. Le co-marquage avec des marqueurs du sarcolemme ou de la membrane basale peut confirmer la localisation.
• Pour les applications ELISA, titrez l'anticorps comme réactif de capture ou de détection en utilisant des fragments de DAG1 recombinants ou des lysats cellulaires dans des conditions standard ; les performances doivent être optimisées dans le système de dosage de l'utilisateur final.
• Une réactivité croisée entre espèces a été rapportée pour l'humain, la souris et le rat ; si vous travaillez avec d'autres espèces, effectuez des tests expérimentaux et confirmez l'homologie de séquence au préalable.

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