Anticorps polyclonal de lapin anti-Cytokératine 9 (KRT9) pour WB, IF-P, ELISA - P35527

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Cytokératine 9 (KRT9)

• La Cytokératine 9 (KRT9), également connue sous le nom de Kératine-9 (K9) ou CK-9, est une kératine cytosquelettique de type I codée par le gène KRT9 chez l'homme.
• Elle sert de composant structurel des filaments intermédiaires spécifiquement dans les kératinocytes suprabasaux de l'épiderme palmoplantaire, s'assemblant avec les kératines de type II pour former des réseaux de kératine robustes.
• Ces réseaux de filaments intermédiaires de kératine sont essentiels pour maintenir l'intégrité mécanique et la résilience de la peau des paumes et des plantes, résistant à une pression et une friction importantes.
• L'expression de KRT9 est strictement limitée à l'épiderme en différenciation terminale des paumes et des plantes, soulignant son rôle spécialisé dans ces zones corporelles à fort stress.
• Les mutations de KRT9 sont associées à l'épidermolyse kératodermique palmoplantaire (EPPK), un trouble cutané autosomique dominant caractérisé par un épaississement diffus de la peau des paumes et des plantes.
• La structure de la protéine présente un domaine central en bâtonnet enroulé (coiled-coil) typique des protéines de filaments intermédiaires, facilitant la dimérisation et l'assemblage des filaments.
• La régulation post-traductionnelle peut inclure des événements de phosphorylation, comme l'indiquent les études protéomiques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 150 à 450 de la KRT9 humaine, une région interne. Cette conception peut permettre la détection de la protéine KRT9 totale dans divers types d'échantillons.
• Pour le Western blot (WB), utilisez des conditions dénaturantes et réductrices, et envisagez d'inclure un contrôle de chargement tel que GAPDH ou β-actine. Le poids moléculaire prédit est d'environ 62 kDa ; validez l'identité de la bande à l'aide de contrôles positifs (par exemple, lysat de peau palmaire) et négatifs appropriés.
• Pour l'immunofluorescence (IF-P), les méthodes de fixation et de perméabilisation doivent être optimisées. Comme la KRT9 est un filament intermédiaire cytoplasmique, la perméabilisation est essentielle. Incluez une contre-coloration nucléaire comme le DAPI pour visualiser la localisation cellulaire.
• Pour les applications ELISA, titrez l'anticorps en utilisant la KRT9 recombinante ou des lysats cellulaires pour déterminer les dilutions de travail optimales. Le couplage avec un anticorps de détection apparié peut améliorer la sensibilité.
• Une réactivité croisée est signalée pour l'humain, la souris et le rat ; cependant, vérifiez la spécificité dans le contexte de l'espèce et du tissu concerné, car l'expression est limitée à l'épiderme palmoplantaire.

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