Anticorps polyclonal de lapin anti-Cytokératine 20 (KRT20) pour WB, IF/ICC, ELISA - P35900

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Cytokératine 20 (KRT20)

• La kératine cytoskletique de type I 20 (KRT20), aussi appelée Cytokératine-20 (CK-20), Kératine-20 (K20) ou protéine IT, est une protéine de filament intermédiaire de la famille des kératines de type I.
• Elle joue un rôle essentiel dans le maintien de l'organisation des filaments de kératine au niveau de l'épithélium intestinal. Lorsqu'elle est phosphorylée, KRT20 intervient dans la sécrétion de mucines dans l'intestin grêle (par similarité).
• Sa localisation subcellulaire est cytoplasmique, ce qui est cohérent avec son rôle de composant du cytosquelette.
• Elle est majoritairement exprimée dans l'épithélium intestinal, avec une localisation spécifique dans les cellules luminales de la muqueuse colique. Elle est également exprimée dans les cellules de Merkel de la muqueuse orale kératinisée, notamment les crêtes gingivales, la couche basale du palais et les papilles gustatives linguales.
• Classée selon les mots-clés UniProt : Apoptose, Coiled coil, Cytoplasme, Séquençage direct des protéines, Filament intermédiaire, Kératine, Phosphoprotéine, Identification protéomique, Protéome de référence.
• La protéine a une masse moléculaire d'environ 48 487 Da (UniProt) mais migre à ~48 kDa en SDS-PAGE.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène correspond à une partie centrale de KRT20 humain (aa 245-424), qui est conservée chez la souris ; la réactivité croisée avec la souris a été validée. Réalisez un alignement de séquence pour d'autres espèces avant utilisation.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 48 kDa est attendue. Optimisez le blocage et la dilution de l'anticorps avec un lysat cellulaire adapté (par exemple, les cellules intestinales Caco-2 ou HT-29).
• En immunofluorescence / immunocytochimie, testez les conditions de fixation et de perméabilisation ; validez la coloration nucléaire par rapport à la coloration cytoplasmique dans les lignées cellulaires intestinales.
• Pour l'ELISA, utilisez la KRT20 recombinante ou un peptide spécifique comme antigène de revêtement ; réalisez une titration pour déterminer la concentration de travail optimale.
• En tant qu'anticorps polyclonal, la cohérence entre lots doit être vérifiée pour l'application visée.

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