Anticorps polyclonal anti-cytokératine 19 (KRT19) pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P08727

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la cytokératine 19 (KRT19)

• Le gène KRT19 code la kératine cytosquelettique de type I 19 (également appelée CK-19 ou K19), un membre de la famille des protéines de filaments intermédiaires de type I.
• Elle joue un rôle essentiel dans l'organisation des myofibres en s'associant à KRT8 pour relier l'appareil contractile à la dystrophine au niveau des costamères des muscles striés.
• La protéine est exprimée dans un large éventail de tissus épithéliaux simples et stratifiés, notamment les kératinocytes basaux des follicules pileux, les épithéliums des glandes sudoripares et mammaires, les voies biliaires, le tractus gastro-intestinal, l'urothélium de la vessie et l'épithélium exocervical.
• Au niveau subcellulaire, KRT19 se localise dans les réseaux cytoplasmiques de filaments intermédiaires et, dans les fibres musculaires, s'accumule au niveau des costamères, des régions spécialisées du sarcolemme contenant de la dystrophine et de la spectrine.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation et la méthylation, et la protéine présente un domaine central en tige à hélice superenroulée typique des kératines.
• Une expression est également observée dans les cellules de la paroi vasculaire des veines et des artères du cordon ombilical, ce qui suggère des fonctions au-delà des tissus épithéliaux.
• UniProt répertorie cette protéine comme membre du protéome de référence dont la structure tridimensionnelle a été déterminée, ce qui souligne son caractère bien caractérisé.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène recombinant (aa 210–340) cible une région conservée de KRT19 chez l'humain, la souris et le rat, ce qui confirme la réactivité croisée entre les espèces rapportée.
• Pour le Western blot, une bande proche de 44 kDa est attendue ; utilisez des lysats de cellules épithéliales (par ex. HeLa, MCF-7) et vérifiez avec des marqueurs de poids moléculaire.
• En IHC-P, optimisez la récupération antigénique (par ex. tampon citrate, pH 6,0) et testez l'anticorps sur des tissus connus pour être positifs à KRT19, tels que la peau, le côlon ou le carcinome mammaire.
• Pour l'IF/ICC, les conditions de fixation (par ex. PFA à 4 %) et de perméabilisation (par ex. Triton X-100 à 0,1 %) doivent être ajustées afin de préserver le réseau de filaments intermédiaires.
• Lors de la réalisation d'un ELISA, envisagez d'utiliser une protéine ou un peptide KRT19 recombinant afin d'établir des courbes standard et de valider la spécificité.
• Incluez toujours des contrôles appropriés : omettez l'anticorps primaire, utilisez des contrôles isotopiques et testez l'anticorps sur des cellules ou tissus négatifs pour KRT19 (par ex. des cellules mésenchymateuses) afin de confirmer la spécificité du signal.

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