Anticorps monoclonal de lapin anti-cytokératine 14 (KRT14) pour WB, IHC-P, ELISA - P02533

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la cytokératine 14

• KRT14 est une protéine de filament intermédiaire de type I essentielle au réseau structurel des kératinocytes basaux. Elle forme des hétéropolymères obligatoires avec KRT5, établissant un réseau cytosquelette résistant qui apporte une résistance mécanique à l'épiderme et aux autres épithéliums stratifiés. Références associées : PMID:11724817, PMID:1694855, PMID:1720261

• Le domaine C-terminal non hélicoïdal de KRT14 favorise l'auto-assemblage des filaments KRT5-KRT14 en gros faisceaux, améliorant la résistance des filaments in vitro. Références associées : PMID:11724817

• KRT14 est principalement cytoplasmique, mais peut également se localiser dans le noyau. Il est fortement exprimé dans la couche basale des épithéliums stratifiés, notamment l'épiderme, l'épithélium cornéen et la gaine externe des follicules pileux, avec une expression diminuée dans les couches suprabasales.

• Les modifications post-traductionnelles telles que la phosphorylation, la formation de ponts disulfures et l'ubiquitination peuvent réguler la dynamique et la stabilité des filaments de KRT14.

• Les variants pathogènes de KRT14 sont associés à des syndromes de fragilité cutanée comme l'épidermolyse bulleuse simple (EBS) et la dysplasie ectodermique, soulignant son rôle essentiel dans l'intégrité épithéliale.

• L'expression de KRT14 est très spécifique aux tissus : il est présent dans les kératinocytes basaux et autour du poil de club pendant le télogène, mais absente de la couche cornée et de la gaine interne du follicule pileux.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène couvre le domaine central en bâtonnet de KRT14 humain (aa 264-457) ; en raison de la forte homologie, l'anticorps est susceptible de présenter une réactivité croisée avec KRT14 de souris et de rat, comme indiqué par le fournisseur. Toujours valider sur l'espèce/le tissu concerné.

• Pour le Western blot, une bande d'environ 52 kDa est attendue ; optimisez la charge d'échantillon et la dilution de l'anticorps pour une détection claire dans les lysats de tissus riches en kératinocytes (par exemple peau, muqueuse buccale).

• Pour IHC-P, utilisez des coupes incluses en paraffine fixées au formol ; une récupération d'antigène peut être nécessaire. Le marquage KRT14 marque les cellules basales ; attendez un signal positif dans la couche basale de l'épiderme et des autres épithéliums stratifiés.

• Pour les applications ELISA, utilisez la protéine KRT14 recombinante purifiée comme étalon et validez avec des échantillons positifs/négatifs connus.

• Étant donné que KRT14 forme des complexes avec KRT5, envisagez des expériences de co-immunoprécipitation pour étudier l'assemblage des filaments de kératine.

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