Anticorps polyclonal anti-Cytokératine 14 (KRT14) pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P02533

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la Cytokératine 14

• La kératine cytosquelettique de type I 14 (KRT14), également désignée sous les noms de Cytokératine-14 (CK-14) et Kératine-14 (K14), appartient à la famille des protéines de filaments intermédiaires de type I.
• La KRT14 forme des hétéropolymères obligatoires avec la kératine de type II KRT5, contribuant au réseau de filaments intermédiaires de kératine qui confère une résistance mécanique et une intégrité structurelle à la couche basale de l’épiderme et à d’autres épithéliums stratifiés. Références associées : PMID:11724817 PMID:1694855 PMID:1720261
• Le domaine caudal non hélicoïdal de la KRT14 favorise l’auto-organisation des filaments KRT5-KRT14 en grands faisceaux et renforce la résilience mécanique des filaments intermédiaires de kératine in vitro. Références associées : PMID:11724817
• Au niveau subcellulaire, la KRT14 se localise à la fois dans le cytoplasme et le noyau, ce qui correspond à son rôle dans le maintien de l’architecture cytosquelettique et à ses fonctions nucléaires potentielles.
• L’expression tissulaire est particulièrement marquée dans les kératinocytes basaux des épithéliums stratifiés : elle est détectée dans l’épithélium cornéen, la couche basale de l’épiderme et la gaine épithéliale externe des follicules pileux anagènes, mais absente des couches suprabasales au stade de différenciation terminale, telles que la couche cornée.
• Les variations génétiques de KRT14 sont associées à plusieurs maladies héréditaires de fragilité cutanée, notamment l’épidermolyse bulleuse simple, la dysplasie ectodermique et la kératodermie palmoplantaire.
• La protéine subit des modifications post-traductionnelles, notamment une phosphorylation et une ubiquitination, et contient des domaines en coiled-coil ainsi que des ponts disulfure essentiels à l’assemblage et à la stabilité des filaments.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 371 à 470 du domaine caudal non hélicoïdal C-terminal ; l’anticorps peut reconnaître préférentiellement les épitopes de cette région, qui jouent un rôle essentiel dans le regroupement des filaments et la résilience mécanique.
• En Western blot, une bande proche de 52 kDa est attendue dans les lysats de kératinocytes ; validez l’identification de la bande à l’aide de contrôles positifs (par exemple, un lysat de cellules HaCaT) et tenez compte du fait que les modifications post-traductionnelles peuvent entraîner de légers décalages de migration.
• En immunohistochimie (paraffine) et en immunofluorescence, un marquage cytoplasmique et nucléaire intense est attendu dans les cellules épithéliales basales ; les sections de peau, de cornée ou de muqueuse buccale conviennent comme tissus de contrôle positif.
• La réactivité croisée rapportée avec les échantillons humains, murins et de rat suggère la conservation des épitopes ; toutefois, pour une utilisation chez d’autres espèces ou dans des applications nécessitant une grande spécificité, il est recommandé d’effectuer un alignement des séquences de la région immunogène.
• Comme il s’agit d’un anticorps polyclonal, la constance entre les lots peut varier ; validez chaque nouveau lot dans votre système d’analyse, en particulier pour les applications quantitatives telles que l’ELISA.
• Pour l’ELISA, l’immunogène peptidique synthétique peut servir d’antigène de revêtement pour le titrage de l’anticorps ou de contrôle positif afin d’évaluer l’activité liée à la plaque.

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