Anticorps polyclonal de lapin anti-cytokératine 12 (KRT12) pour WB et ELISA - Q99456

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la cytokératine 12 (KRT12)

• Code pour une protéine de filament intermédiaire kératine de type I, la kératine 12 (K12), qui s'associe à la kératine KRT3 de type II pour former des filaments hétéropolymériques dans l'épithélium cornéen.
• Essentiel pour fournir une résistance mécanique et une intégrité structurelle à la couche épithéliale cornéenne, protégeant ainsi la surface oculaire.
• Son expression est limitée à l'épithélium cornéen, ce qui a été confirmé au niveau protéique, ce qui en fait un marqueur fiable pour les cellules épithéliales cornéennes.
• Les mutations du gène KRT12 sont associées à la dystrophie cornéenne de Meesmann (MECD1), une maladie autosomique dominante caractérisée par la présence de microkystes de l'épithélium cornéen.
• Appartient à la famille des gènes de kératines des filaments intermédiaires, essentielle pour la cytoarchitecture et la résistance des tissus épithéliaux.
• La protéine subit des modifications post-traductionnelles et a été identifiée par séquençage protéique direct et par protéomique basée sur la spectrométrie de masse.
• Le poids moléculaire prédit par UniProt est d'environ 53,5 kDa (53511 Da), ce qui correspond au poids observé du produit de 54 kDa.
• En tant que protéine de filament intermédiaire, KRT12 se localise majoritairement dans le cytoplasme des cellules épithéliales cornéennes.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène correspond à la région C-terminale (aa 295-494) de la KRT12 humaine, englobant une partie des domaines tige et queue. Cette région peut conférer une spécificité par rapport aux autres kératines ; la spécificité doit être confirmée à l'aide de protéines recombinantes ou de contrôles appropriés.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 54 kDa est attendue. Utilisez des lysats de contrôle positifs issus de cellules épithéliales cornéennes humaines ou d'extraits de tissus. La réactivité croisée avec la souris et le rat suggère une utilité potentielle pour les études cornéennes chez les rongeurs, mais une validation chez ces espèces est recommandée.
• En ELISA, l'anticorps peut être utilisé pour la détection directe ou indirecte. Optimisez les conditions de revêtement et la dilution de l'anticorps expérimentalement. Lors du développement d'un ELISA sandwich, l'association avec un anticorps de capture spécifique de KRT12 peut améliorer les performances.
• En tant qu'anticorps polyclonal, une variabilité d'un lot à l'autre est possible. La performance constante doit être vérifiée à l'aide de protocoles standardisés et de contrôles internes.
• Les applications autres que WB et ELISA (par exemple immunofluorescence, immunohistochimie) ne sont pas indiquées dans les spécifications et nécessiteraient une validation complète par l'utilisateur final.

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