Anticorps Polyclonal Anti-Cytohésine-1 (CYTH1) pour WB, IF/ICC, ELISA - Q15438

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de la Cytohésine-1

• La Cytohésine-1 (CYTH1) est un membre de la famille des cytohésines de facteurs d'échange de nucléotides guaniques (GEF) qui activent les petites GTPases du facteur d'ADP-ribosylation (ARF), servant de régulateur crucial du trafic vésiculaire intracellulaire.
• La protéine est caractérisée par un domaine d'homologie à la pleckstrine (PH) pour la liaison aux phosphoinositides, un domaine Sec7 responsable de son activité GEF, et un domaine enroulé en hélice (coiled-coil) impliqué dans les interactions protéine-protéine.
• CYTH1 catalyse spécifiquement l'échange de nucléotides guaniques sur ARF1, ARF5 et ARF6 en favorisant le remplacement du GDP par du GTP, contrôlant ainsi leur état d'activation.
• Par la régulation d'ARF6, elle joue un rôle pivot dans les événements de trafic membranaire essentiels pour le remodelage des jonctions et l'établissement de la polarité des cellules épithéliales.
• Exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus, reflétant son rôle fondamental dans les processus de transport cellulaire.
• À l'échelle subcellulaire, CYTH1 se localise à la membrane cellulaire, au cytosol et aux jonctions cellule-cellule, y compris les jonctions serrées et les jonctions d'adhérence, cohérent avec ses fonctions dans la dynamique membranaire et l'adhésion cellulaire.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation et la conjugaison à l'ubiquitine, et la structure tridimensionnelle de la protéine a été résolue.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'immunogène est constitué des 70 acides aminés N-terminaux de CYTH1 humaine, une région qui peut être conservée entre les espèces (favorisant la réactivité croisée de l'anticorps avec la souris et le rat) et potentiellement retenue dans les isoformes d'épissage alternatif.
• Pour le Western blot, la bande attendue migre à environ 46 kDa ; la dilution optimale de l'anticorps et les conditions de blocage doivent être déterminées de manière empirique en utilisant des lysats de témoins positifs (par exemple, cellules HeLa, HEK293 ou U-2 OS).
• En immunofluorescence/immunocytochimie, des fixatifs tels que la paraformaldéhyde à 4 % et une perméabilisation avec 0,1 à 0,3 % de Triton X-100 sont recommandés ; cependant, la méthode choisie doit préserver les structures membranaires et jonctionnelles où CYTH1 se localise.
• Pour les applications ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réagent de capture ou de détection après une optimisation appropriée, incluant le test de différentes conditions d'enrobage et de blocage.

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