Anticorps monoclonal de lapin anti-Cystatine C pour WB, ELISA - P01034

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Cystatine C

• La cystatine C (également connue sous le nom de cystatine-3, gamma-trace, polypeptide basique neuroendocrinien, post-gamma-globuline) est un inhibiteur de cystéine protéase sécrété codé par le gène CST3.
• Elle fonctionne comme un puissant inhibiteur des cystéine protéases lysosomales (cathépsines B, H, L, S) et des enzymes extracellulaires de type papaïne, régulant l'activité protéolytique dans divers fluides biologiques.
• Appartient à la superfamille des cystatines (cystatines de type 2), partageant un repliement cystatine conservé avec des ponts disulfure essentiels à la stabilité structurelle.
• Principalement localisée dans l'espace extracellulaire ; elle est sécrétée et retrouvée en concentrations élevées dans le liquide céphalo-rachidien, le plasma et d'autres fluides corporels.
• Présente une expression tissu-spécifique : la plus élevée dans l'épididyme, le canal déférent, le cerveau, le thymus et l'ovaire ; plus faible dans la glande sous-maxillaire ; présente dans la salive sous-maxillaire et sublinguale mais absente dans la salive parotide.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent le clivage du peptide signal, la glycosylation N-liée et la phosphorylation, contribuant à sa diversité fonctionnelle.
• Impliquée dans de multiples pathologies, notamment la dégénérescence maculaire liée à l'âge (ARMD11), l'angiopathie amyloïde cérébrale, l'angiopathie amyloïde héréditaire à cystatine C (HCCAA) et la leucodystrophie, impliquant souvent la formation de fibrilles amyloïdes.
• Signification diagnostique : les taux sériques de cystatine C sont utilisés comme marqueur de la fonction rénale, et sa présence dans les fluides corporels aide au suivi des troubles rénaux et neurologiques.

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour le WB, envisagez d'utiliser un contrôle positif tel que du sérum humain ou du liquide céphalo-rachidien, où la cystatine C est abondante ; attendez-vous à une bande autour de 13 kDa pour la protéine mature dans des conditions réductrices.
• Lors de l'analyse d'échantillons de souris, validez d'abord la réactivité croisée, car l'anticorps détecte la cystatine C humaine et murine ; le rein ou le sérum de souris peuvent servir de contrôles positifs.
• Pour l'ELISA, l'appariement de cet anticorps de capture avec un anticorps de détection de clonalité ou d'épitope différent peut améliorer le signal ; optimisez les conditions de revêtement et de blocage pour la cystatine C sécrétée native.
• Assurez une préparation minutieuse des échantillons pour les protéines de faible poids moléculaire (≤15 kDa) en utilisant des tailles de pores de membrane et des temps de transfert appropriés pour éviter les pertes lors du transfert Western.
• Envisagez d'utiliser la cystatine C humaine recombinante comme étalon et contrôle positif pour les dosages quantitatifs.

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