Anticorps polyclonal anti-CYP51A1 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q16850

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CYP51A1

• CYP51A1, également connue sous le nom de lanostérol 14-alpha-déméthylase, est une enzyme clé de la voie de biosynthèse du cholestérol. Elle convertit le lanostérol en 4,4-diméthyl-5alpha-cholesta-8,14,24-trièn-3bêta-ol en éliminant le groupe 14alpha-méthyle, une étape essentielle pour la production de cholestérol et la synthèse ultérieure des hormones stéroïdiennes. Références associées : PMID:20149798 PMID:8619637 PMID:9559662
• L’enzyme appartient à la superfamille des cytochromes P450 (famille 51, sous-famille A) et fonctionne comme une monooxygénase, nécessitant des cofacteurs héminiques et du fer pour son activité oxydative.
• CYP51A1 se localise dans la membrane du réticulum endoplasmique et dans les fractions microsomales, ce qui est cohérent avec son rôle dans le métabolisme lipidique au niveau des membranes.
• L’épissage alternatif du gène CYP51A1 produit plusieurs isoformes, qui peuvent avoir des rôles régulateurs distincts ou présenter des profils d’expression spécifiques aux tissus.
• Exprimée de manière ubiquitaire, CYP51A1 présente les niveaux d’expression les plus élevés dans les testicules, les ovaires, les glandes surrénales, la prostate, le foie, les reins et les poumons, ce qui reflète le besoin généralisé de cholestérol dans les membranes cellulaires et la synthèse hormonale.
• La protéine subit des modifications post-traductionnelles telles que l’ubiquitination (conjugaison Ubl), qui peuvent réguler sa stabilité ou sa fonction.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 245-420 de CYP51A1, une région qui peut être conservée chez l’homme, la souris et le rat, ce qui favorise la réactivité croisée indiquée.
• Pour le Western blot (WB), le poids moléculaire prédit est d’environ 57 kDa. Utiliser des lysats de contrôle positif appropriés provenant de tissus présentant une expression élevée, tels que les testicules ou le foie.
• Lors de la réalisation d’une immunohistochimie (IHC-P), des méthodes de démasquage antigénique peuvent être nécessaires, et la coloration doit être validée sur des coupes de tissus positifs connus.
• Pour l’immunofluorescence (IF/ICC), envisager des protocoles de perméabilisation afin de permettre l’accès de l’anticorps à la cible localisée dans le réticulum endoplasmique.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter une optimisation de l’antigène de revêtement et du système de détection ; valider avec la protéine CYP51A1 recombinante.

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