Anticorps polyclonal de lapin anti-CYP46A1 pour WB, IF/ICC, ELISA - Q9Y6A2

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la CYP46A1

• La CYP46A1 est une monooxygénase du cytochrome P450 qui agit comme une cholestérol 24-hydroxylase, jouant un rôle majeur dans l'homéostasie du cholestérol cérébral en catalysant l'hydroxylation en C-24 de la chaîne latérale du cholestérol, favorisant ainsi l'élimination du cholestérol des neurones. Références associées : PMID:10377398 PMID:14640697 PMID:18621681
• En plus du cholestérol, elle hydroxylé divers dérivés du cholestérol et des hormones stéroïdiennes à la fois sur le noyau et la chaîne latérale, les convertissant en oxystérols actifs qui participent à la signalisation lipidique et à la biosynthèse. Références associées : PMID:12077124 PMID:14640697 PMID:28190002
• Agit comme une époxydase en convertissant le desmostérol en (24S),25-époxycholestérol, un ligand pour les récepteurs nucléaires NR1H2 et NR1H3, dont il a été démontré qu'il favorise la neurogenèse dans le cerveau en développement. Références associées : PMID:25017465
• Peut également catalyser le métabolisme oxydatif de xénobiotiques comme le clotrimazole. Références associées : PMID:20667828
• En favorisant l'élimination du cholestérol, la CYP46A1 peut indirectement activer la voie du mévalonate et coordonner la synthèse de nouveau cholestérol et d'isoprénoïdes non stéroïdiens impliqués dans l'activité synaptique et l'apprentissage (Par similarité).
• Se localise à la membrane du réticulum endoplasmique, à la membrane des microsomes, dans les régions pré- et postsynaptiques et les projections dendritiques.
• L'expression est spécifique au cerveau, avec des niveaux d'ARNm plus élevés dans les zones de matière grise ; l'expression augmente linéairement avec l'âge et est absente dans les tissus fœtaux.
• Mots-clés : Hème, fer, liaison aux métaux, monooxygénase, oxydoréductase, métabolisme des stérols, métabolisme du cholestérol, synapse, transmembranaire, épissage alternatif.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 24–280, couvrant une grande partie N‑terminale de la protéine ; bien que cette région soit susceptible de générer des anticorps contre la CYP46A1 de pleine longueur, il est conseillé de valider la réactivité dans le système d'échantillon pertinent, en particulier lors de la détection d'isoformes ou de fragments potentiels.
• Pour le Western blot, une bande proche de 57 kDa est attendue ; envisagez d'utiliser un gel SDS‑PAGE à 10% et des conditions de transfert appropriées pour cette plage de poids moléculaire.
• En immunofluorescence/ICC, comme la CYP46A1 est une protéine membranaire intégrale du RE, une perméabilisation douce avec des détergents comme le Triton X‑100 à 0,1% est recommandée ; une co‑marquage avec un marqueur du RE peut confirmer la localisation.
• Pour les applications ELISA, titrez l'anticorps comme réactif de capture ou de détection et optimisez en utilisant un contrôle positif connu (par exemple, protéine CYP46A1 recombinante ou lysat tissulaire) ; la réactivité croisée avec les orthologues de souris et de rat permet son utilisation dans des modèles rongeurs.

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