Anticorps monoclonal de lapin anti-CYP39A1 pour WB, IHC-P, ELISA - Q9NYL5

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CYP39A1

• CYP39A1 code pour une monooxygénase du cytochrome P450 connue sous le nom de 24-hydroxycholestérol 7-alpha-hydroxylase, également appelée oxystérol 7-alpha-hydroxylase.
• Elle catalyse la 7-alpha hydroxylation du (24S)-hydroxycholestérol, une étape clé dans la conversion des oxystérols neuraux en acides biliaires dans le foie, contribuant ainsi à l'élimination du cholestérol neural. Références associées : PMID:10748047 PMID:25201972
• L'enzyme utilise de l'oxygène moléculaire et du NADPH via la cytochrome P450 réductase pour insérer un atome d'oxygène dans le substrat et réduire le second en eau. Références associées : PMID:10748047 PMID:25201972
• CYP39A1 est un membre de la superfamille du cytochrome P450 et possède un site actif hème-fer, caractéristique de ses fonctions de monooxygénase et d'oxydoréductase.
• Au niveau subcellulaire, elle se localise à la membrane du réticulum endoplasmique et à la membrane des microsomes.
• Son expression tissulaire est spécifique du foie, ce qui correspond à son rôle dans la synthèse hépatique des acides biliaires.
• La protéine contient une hélice transmembranaire et une séquence signal, avec un poids moléculaire prédit d'environ 54 kDa (UniProt : 54116 Da).

Guide expérimental et conseils techniques

• Pour le Western blot, envisagez une gamme de dilution de départ de 1:500 à 1:2000, et validez avec des contrôles positifs et négatifs appropriés (par exemple, des lysats de foie).
• En IHC-P, la récupération antigénique par démasquage épitopique induit par la chaleur (HIER) à pH 6 ou 9 peut améliorer la détection ; titrez l'anticorps pour optimiser l'intensité de la coloration.
• Les performances en ELISA peuvent être optimisées par des formats directs ou en sandwich, en couplant avec des antigènes protéiques recombinants ou peptidiques appropriés.
• L'immunogène étant un peptide des acides aminés 301–400, l'anticorps peut présenter une réactivité croisée avec CYP39A1 de souris en raison de l'homologie de séquence ; confirmez la réactivité dans votre système expérimental.
• Étant donné l'expression spécifique du foie, les lysats ou coupes de tissu hépatique sont recommandés comme contrôles positifs ; utilisez des modèles knock-out ou des siRNA pour vérifier la spécificité.

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