Anticorps polyclonal anti-CYP2F1 pour WB, IHC-P, ELISA - P24903

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CYP2F1

• Le cytochrome P450 2F1 (CYP2F1) est un membre de la superfamille des monooxygénases du cytochrome P450, qui catalysent l'oxydation de substances organiques et sont essentielles dans le métabolisme des xénobiotiques et des composés endogènes.
• L'enzyme peut participer au métabolisme de divers pneumotoxiques, y compris le naphtalène, et est capable de désalkyler l'éthoxycoumarine, la propoxycoumarine et la pentoxyresorufine, bien qu'elle ne montre aucune activité envers l'éthoxyresorufine et seulement une activité de désarylation à l'état de traces envers la benzyloxyresorufine.
• CYP2F1 bioactive le 3-méthylindole (3MI) par déshydrogénation en 3-méthylène-indolénine putatif électrophile, un composé impliqué dans la toxicité pulmonaire.
• Cette protéine se localise à la membrane du réticulum endoplasmique et à la membrane des microsomes, ce qui correspond à son rôle dans le système monooxygénase microsomal.
• Son expression tissulaire est principalement dans le poumon, avec une détection rare dans le foie et le placenta, soulignant sa fonction spécialisée dans le métabolisme des voies respiratoires.
• CYP2F1 contient un groupe prosthétique hème et un cofacteur fer, essentiels à son activité catalytique, et est classée comme une oxydoréductase. Un épissage alternatif du gène CYP2F1 a été rapporté, pouvant produire différentes isoformes.
• Le poids moléculaire calculé de l'isoforme canonique est d'environ 55,5 kDa, ce qui correspond à la bande observée à 56 kDa sur SDS-PAGE.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 100–290 du CYP2F1 humain, une région probablement située dans le domaine cytoplasmique qui peut présenter une conservation suffisante entre les espèces pour permettre la réactivité croisée observée avec l'humain, la souris et le rat.
• Pour le Western blot, une dilution de départ typique pour les anticorps polyclonaux peut être explorée (par exemple, 1:500–1:2000), et le test doit être validé dans une lignée cellulaire ou un lysat tissulaire d'origine pulmonaire où l'expression de CYP2F1 est attendue.
• En IHC-P, des méthodes de récupération d'antigène (par exemple, récupération d'épitope induite par la chaleur à pH 6 ou 9) peuvent être nécessaires ; incluez des contrôles appropriés tels que des coupes de tissu pulmonaire. Un test préliminaire avec différents protocoles de fixation est recommandé.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection dans un format sandwich, mais la réactivité croisée avec d'autres membres de la famille CYP doit être évaluée en raison des similitudes de séquence.
• Étant donné que CYP2F1 est une protéine membranaire, envisagez d'utiliser des détergents doux dans les tampons de lyse (par exemple, 1% de NP-40 ou de Triton X-100) pour assurer une solubilisation correcte.

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