Anticorps monoclonal de lapin anti-CYP2D6 pour WB, IF-P, ELISA - P10635

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CYP2D6

• Le cytochrome P450 2D6 (CYP2D6), également appelé 4-hydroxylase de la débrisoquine, est une enzyme monooxygénase appartenant à la superfamille des cytochromes P450. Elle est codée par le gène CYP2D6, qui subit un épissage alternatif pour générer plusieurs isoformes.
• La CYP2D6 catalyse le métabolisme oxydatif de divers substrats endogènes et exogènes, notamment les acides gras, les stéroïdes, les rétinoïdes et de nombreux médicaments thérapeutiques (par exemple, les antiarythmiques, les antagonistes des récepteurs adrénergiques et les antidépresseurs tricycliques). Références associées : PMID:18698000 PMID:19965576 PMID:20972997
• L’enzyme est principalement localisée dans la membrane du réticulum endoplasmique et dans les fractions microsomales des cellules hépatiques, ce qui correspond à son rôle central dans le métabolisme de phase I.
• La CYP2D6 contient un cofacteur fer-hème essentiel à son activité catalytique et est classée comme une oxydoréductase liant les métaux.
• Elle métabolise spécifiquement les endocannabinoïdes, tels que l’anandamide, en produisant des dérivés époxyde et hydroxy pouvant moduler les voies de signalisation. Références associées : PMID:18698000 PMID:21289075
• La CYP2D6 convertit également le cholestérol en 25-hydroxycholestérol, un régulateur physiologique de l’homéostasie cellulaire du cholestérol. Références associées : PMID:21576599
• En outre, elle catalyse la transformation oxydative du rétinol tout-trans en rétinal tout-trans, un précurseur de la biosynthèse de l’acide rétinoïque. Références associées : PMID:10681376

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour le Western blot (WB), une bande d’environ 56 kDa est attendue. Utilisez des lysats de contrôle positif appropriés provenant de tissus hépatiques humains, murins ou de rat, ou de cellules exprimant la CYP2D6, afin de confirmer la spécificité.
• Dans les expériences d’immunofluorescence sur paraffine (IF-P), optimisez les étapes de récupération antigénique et de perméabilisation afin d’assurer une exposition adéquate de la cible localisée dans la membrane du réticulum endoplasmique. Un contre-marquage avec un marqueur du réticulum endoplasmique est recommandé pour la colocalisation.
• Pour les applications ELISA, envisagez d’utiliser le fragment immunogène recombinant de CYP2D6 comme étalon quantitatif afin de générer des courbes d’étalonnage fiables.
• En raison des polymorphismes génétiques de CYP2D6, les niveaux d’expression peuvent varier d’un individu à l’autre ; il est conseillé de valider l’anticorps dans la matrice d’échantillon prévue et de prendre en compte les informations génotypiques lors de l’interprétation des résultats.
• La source monoclonale de lapin garantit une forte affinité et une bonne reproductibilité entre les lots, mais les dilutions optimales doivent être déterminées empiriquement pour chaque test et chaque type d’échantillon.

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