Anticorps monoclonal de lapin anti-CYP27A1 pour WB et ELISA - Q02318

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CYP27A1 (Stérol 26-hydroxylase)

• CYP27A1 code pour une enzyme mitochondriale du cytochrome P450, la stérol 26‑hydroxylase, appartenant à la famille CYP27.
• Elle catalyse l'hydroxylation en trois étapes du cholestérol au niveau du groupe méthyle terminal, produisant du 27‑hydroxycholestérol, un oxystérol critique.
  Références associées : PMID:12077124, PMID:21411718, PMID:28190002
• Grâce à cette activité, CYP27A1 régule l'homéostasie du cholestérol en initiant la synthèse des acides biliaires via les voies classique et alternative.
  Références associées : PMID:11412116, PMID:1708392, PMID:2019602
• Les oxystérols résultants agissent comme ligands pour les récepteurs X du foie (LXR), modulant la transcription des gènes impliqués dans le métabolisme des lipides.
  Références associées : PMID:12077124, PMID:9660774
• CYP27A1 est également impliquée dans le métabolisme du 7‑kétocoholestérol dans la rétine, protégeant potentiellement contre les dommages inflammatoires, et dans le métabolisme du cholestanol dans le cervelet, aidant à l'élimination des stérols à travers la barrière hémato-encéphalique.
  Références associées : PMID:21411718, PMID:28190002
• De plus, CYP27A1 peut contribuer à l'activation de la vitamine D en catalysant la 25‑hydroxylation de la vitamine D3.
  Références associées : PMID:15465040
• La protéine réside dans la membrane interne mitochondriale et est détectée dans la rétine neurale, l'épithélium pigmentaire rétinien, et la matière grise et blanche du cervelet.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à un peptide C‑terminal (aa 431‑530) ; confirmer la réactivité de l'anticorps contre CYP27A1 natif et dénaturé via des tests WB et ELISA parallèles.
• Pour le Western blot, une bande à ~60 kDa est attendue ; l'utilisation de lysats enrichis en mitochondries provenant de tissus hépatiques ou rétiniens peut améliorer la sensibilité de détection.
• En ELISA, envisagez d'utiliser un peptide synthétique ou la protéine recombinante complète CYP27A1 comme antigène de capture pour évaluer la spécificité et l'affinité de liaison.
• La réactivité croisée avec CYP27A1 de souris et de rat rend cet anticorps adapté aux études translationnelles, mais validez la réactivité dans les matrices d'échantillons spécifiques à l'espèce concernée.
• Étant donné que CYP27A1 est une protéine membranaire peu abondante, envisagez des stratégies d'immunoprécipitation ou d'amplification du signal pour les échantillons à faible expression.

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