Anticorps polyclonal de lapin anti-CYBA pour WB, IF/ICC, ELISA - P13498

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la CYBA (p22phox)

• Le gène CYBA code la protéine p22phox, la chaîne légère du complexe cytochrome b-245 (également appelé cytochrome b(558)), qui constitue une sous-unité essentielle du complexe oxydase NADPH des phagocytes. Références associées : PMID:15824103, PMID:17140397, PMID:38355798

• Le complexe oxydase NADPH transfère les électrons du NADPH cytosolique vers l'oxygène moléculaire, générant l'anion superoxyde (O2(-)), une espèce réactive de l'oxygène essentielle à la défense de l'hôte et à la signalisation cellulaire. Références associées : PMID:38355798

• La p22phox sert de plateforme pour l'assemblage des sous-unités régulatrices cytosoliques, et sa région C-terminale est phosphorylée, ce qui permet la liaison de NCF1/p47-phox et l'initiation de l'activation du complexe. Références associées : PMID:19948736

• La CYBA s'associe également à la NOX3 pour former une oxydase NADPH constitutivement active qui génère du superoxyde dans les cellules non phagocytaires. Références associées : PMID:15824103, PMID:17140397

• Lors de son activation, la protéine se localise sur la membrane cellulaire et la membrane phagosomale.

• La CYBA contient des hélices transmembranaires et lie des cofacteurs hémiques et ferriques essentiels au transfert d'électrons.

• Les mutations du gène CYBA sont associées à la granulomatose septique chronique (CGD), une immunodéficience primaire caractérisée par une production défectueuse de superoxyde.

• La protéine est soumise à des modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation et l'ubiquitination.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond aux acides aminés 126–195 de la CYBA humaine, une région conservée chez l'humain, la souris et le rat, ce qui concorde avec la réactivité croisée observée. Pour détecter la CYBA endogène, envisagez de valider l'anticorps dans des lignées cellulaires pertinentes (par exemple, des neutrophiles ou des macrophages) ou dans des tissus.
• Pour le western blot, un poids moléculaire prédit de 21 kDa est attendu. Toutefois, les modifications post-traductionnelles peuvent entraîner de légers décalages. Incluez des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• Dans les applications d'immunofluorescence, la CYBA se localise sur la membrane plasmique ; des profils de marquage membranaire doivent donc être observés. Les conditions de perméabilisation doivent être optimisées pour le type de cellule cible.
• Les protocoles d'ELISA doivent être optimisés avec un tampon de revêtement et un système de détection adaptés, en veillant à assurer un blocage approprié afin de réduire les liaisons non spécifiques.

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