Anticorps polyclonal anti-CYB5R3 pour WB, IF/ICC, ELISA - P00387

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CYB5R3

• La NADH-cytochrome b5 réductase 3 (CYB5R3), également appelée diaphorase-1, est une flavoprotéine (contenant du FAD) codée par le gène CYB5R3 (DIA1) chez l'homme.
• CYB5R3 catalyse la réduction de deux molécules de cytochrome b5 en utilisant le NADH comme donneur d'électrons, jouant un rôle crucial dans le transport d'électrons et les réactions redox.
• L'enzyme est impliquée dans le métabolisme lipidique, notamment la biosynthèse du cholestérol et la désaturation des acides gras, par son interaction avec le cytochrome b5.
• CYB5R3 est localisée sur la membrane du réticulum endoplasmique, la membrane externe mitochondriale et dans le cytoplasme, ce qui reflète ses rôles multifonctionnels.
• Elle est exprimée aux stades tardifs de la maturation érythroïde, ce qui suggère une fonction importante dans le métabolisme des globules rouges.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, la myristoylation et la phosphorylation, qui peuvent réguler son association membranaire et son activité.
• Les mutations du gène CYB5R3 sont associées à la méthémoglobinémie congénitale, ce qui souligne son importance clinique.
• La protéine a un poids moléculaire calculé d'environ 34 kDa (34235 Da), ce qui correspond à la bande observée en western blotting.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 125 à 334 de la CYB5R3 humaine (NP_001165131.1), une région conservée parmi les isoformes typiques ; vérifiez la réactivité croisée pour des systèmes autres qu'humain, souris ou rat si nécessaire.
• En western blotting, attendez une bande principale autour de 34 kDa ; l'épissage alternatif ou les modifications post-traductionnelles peuvent produire des bandes supplémentaires, donc validez dans le lysat cellulaire ou tissulaire concerné.
• Pour l'immunofluorescence/ICC, l'anticorps détecte CYB5R3 dans le réticulum endoplasmique et les mitochondries, produisant un motif cytoplasmique réticulé et ponctué ; utilisez des marqueurs organellaires pour les études de colocalisation.
• Pour l'ELISA, titrez l'anticorps et utilisez des contrôles positifs appropriés ; l'association avec un anticorps de détection adapté est recommandée pour les tests sandwich.
• Conservez l'anticorps à la température recommandée (par exemple, -20°C) à réception et minimisez les cycles de gel-dégel pour préserver son activité.

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