Anticorps monoclonal de lapin anti-CXCR4 pour WB, ELISA - P61073

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CXCR4

• Le CXCR4 (récepteur de chimiokine de type 4 C-X-C, CD184, Fusin) est un récepteur couplé aux protéines G (GPCR) qui se lie spécifiquement à la chimiokine CXCL12/SDF-1. La liaison du ligand déclenche une transduction du signal en augmentant les niveaux intracellulaires d'ions calcium, en améliorant l'activation de MAPK1/MAPK3 et en inhibant l'adénylate cyclase via un couplage aux protéines Gi. Références associées : PMID:10074102, PMID:10452968, PMID:10644702, PMID:16725153, PMID:17197449, PMID:18799424, PMID:39093700
• La signalisation du CXCR4 engage la voie AKT et régule la migration cellulaire, jouant un rôle critique dans la cicatrisation des plaies. Références associées : PMID:24912431, PMID:28978524
• Outre la CXCL12, le CXCR4 agit comme un récepteur pour l'ubiquitine extracellulaire (augmentant le calcium intracellulaire et réduisant l'AMPc) et pour le lipopolysaccharide bactérien (LPS), médiant la sécrétion de cytokines inflammatoires (TNF) par les monocytes. Références associées : PMID:20228059, PMID:11276205
• Dans l'infection virale, le CXCR4 fonctionne comme un corécepteur (avec le CD4) pour les isolats X4 du virus de l'immunodéficience humaine-1 (VIH-1) et comme récepteur primaire pour certains isolats du VIH-2, favorisant l'entrée virale. Références associées : PMID:10074122, PMID:10756055, PMID:8849450
• La localisation subcellulaire est principalement à la membrane plasmique, aux jonctions cellulaires, et il circule à travers les endosomes précoces, les endosomes tardifs et les lysosomes.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la sulfatation, la phosphorylation, la glycosylation et la formation de ponts disulfure ; il est également sujet à l'ubiquitination. Le récepteur est un protéoglycane.
• Le CXCR4 est largement exprimé, l'isoforme 1 étant prédominante, dans des tissus incluant les leucocytes du sang périphérique, la rate, le thymus, la moelle épinière, le cœur, le placenta, le poumon, le foie, le muscle squelettique, le rein, le pancréas, le cerveau (cervelet, cortex cérébral, moelle, microglie, astrocytes) et les cellules endothéliales. L'épissage alternatif produit des variants supplémentaires.
• Par analogie, le CXCR4 contribue à l'hématopoïèse, à la formation du septum ventriculaire cardiaque, à la vascularisation du tractus gastro-intestinal et au développement des neurones du cervelet/de l'hippocampe.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à la région intracellulaire C-terminale (aa 253-352), suggérant que l'anticorps cible probablement un épitope dans le domaine cytoplasmique. Pour le Western blot, des conditions dénaturantes et réductrices sont recommandées pour exposer l'épitope.
• En Western blot, le poids moléculaire prédit du CXCR4 est d'environ 40 kDa ; cependant, en raison de la glycosylation et d'autres modifications post-traductionnelles, la bande apparente peut migrer à un poids moléculaire plus élevé dans certains types cellulaires.
• Pour les applications ELISA, envisagez d'utiliser un anticorps de détection ciblant un épitope extracellulaire distinct si vous développez un test en sandwich. Validez toujours les conditions du test avec des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• Puisque le CXCR4 est exprimé dans de nombreuses cellules immunitaires et endothéliales, de bons lysats de contrôle positif incluent Jurkat, THP-1 ou PBMC ; pour les tissus, la rate ou le thymus peuvent bien fonctionner.
• Si vous étudiez la fonction de corécepteur du VIH, notez que l'anticorps peut ne pas bloquer l'entrée virale car il cible un épitope intracellulaire.

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