Anticorps polyclonal de lapin anti-Cullin 4A pour WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q13619

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Cullin-4A

• CUL4A agit comme protéine d'échafaudage centrale au sein des complexes ligases ubiquitine E3 à Cullin-RING (CRL), permettant le transfert de l'ubiquitine vers les protéines substrats en positionnant à la fois le substrat et l'enzyme de conjugaison de l'ubiquitine. L'activité ligase dépend de la neddylation de la culline et est inhibée par l'association de CUL4A déneddylée avec CAND1. Références associées : PMID:14578910, PMID:14739464, PMID:15448697
• Le complexe DCX(DDB2) utilise DDB2 comme récepteur de substrat pour ubiquitiner XPC, les histones H3-H4 et d'autres cibles, jouant un rôle essentiel dans la réparation par excision de nucléotides et l'assemblage des nucléosomes lié à la réplication. Références associées : PMID:15811626, PMID:16678110, PMID:17041588, PMID:24209620
• Via le complexe DCX(DTL), CUL4A médie la polyubiquitination dépendante de PCNA de CDT1 et l'ubiquitination dépendante de MDM2 de p53/TP53 en réponse à des dommages à l'ADN et pendant la réplication de l'ADN, et dirige également l'autoubiquitination de DTL. De plus, le complexe DDB1-CUL4A-DTL régule le rythme circadien en ubiquitinant CRY1 pour sa dégradation. Références associées : PMID:14578910, PMID:15448697, PMID:15548678, PMID:23478445, PMID:26431207
• Le complexe DCX(ERCC8) (complexe CSA) participe à la réparation couplée à la transcription (TCR), qui élimine les lésions de l'ADN des gènes activement transcrits. Références associées : PMID:12732143, PMID:32355176, PMID:38316879
• Le complexe DCX(AMBRA1) fonctionne comme régulateur principal de la transition G1/S du cycle cellulaire en ciblant la cycline D phosphorylée (CCND1, CCND2, CCND3) pour l'ubiquitination et la dégradation. Il régule également les complexes CRL5 via l'ubiquitination et la dégradation de l'Elongine-C (ELOC). Références associées : PMID:33854232, PMID:33854239, PMID:30166453
• CUL4A est impliquée dans l'ubiquitination de nombreux autres substrats, notamment JUN (via DET1-COP1), CDKN1B/p27 (avec DDB1-SKP2) et HOXA9, ce qui met en évidence ses larges rôles régulateurs. Références associées : PMID:14739464, PMID:16537899, PMID:14609952
• Avec CUL4B, CUL4A contribue à la biogenèse des ribosomes. Références associées : PMID:26711351

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 1 à 300 de la CUL4A humaine, ce qui indique que l'anticorps cible la région N-terminale ; cela peut influencer l'accessibilité de l'épitope dans certains tests.
• En Western blotting (WB), attendez une bande à environ 88 kDa ; ajoutez des inhibiteurs de protéases pendant la lyse et envisagez d'utiliser des échantillons frais pour éviter la dégradation.
• Pour l'immunoprécipitation (IP), validez la capacité de l'anticorps à capturer les complexes CUL4A natifs dans des conditions non dénaturantes.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), optimisez les protocoles de fixation/perméabilisation, car CUL4A est majoritairement nucléaire ; confirmez la spécificité du coloration avec des contrôles appropriés.
• Cet anticorps présente une réactivité croisée avec la CUL4A humaine, souris et rat ; lorsque vous utilisez des échantillons de rongeurs, assurez-vous que le système de détection est compatible et que la bande cible est distinguishable des immunoglobulines endogènes en IP.
• En tant qu'anticorps polyclonal, une variabilité d'un lot à l'autre peut survenir ; envisagez de titrer l'anticorps pour chaque nouvelle application et d'inclure des contrôles positifs et négatifs.

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