Anticorps polyclonal anti-CUL4B pour WB, ELISA - Q13620

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de CUL4B

• CUL4B agit comme une protéine d’échafaudage au sein des complexes de ligases E3 de l’ubiquitine de type culline-RING, orchestrant le positionnement des substrats et le transfert de l’ubiquitine vers les protéines cibles destinées à être dégradées par le protéasome. Références associées : PMID:14578910, PMID:16678110, PMID:18593899
• En réponse aux dommages de l’ADN, les complexes contenant CUL4B assurent la polyubiquitination de CDT1 et des histones H2A, H3 et H4, et sont ciblés vers la chromatine endommagée par les UV via DDB2, ce qui implique CUL4B dans la réparation et la réplication de l’ADN. Références associées : PMID:14578910, PMID:16678110, PMID:18593899
• Le sous-complexe DCX(AMBRA1), contenant CUL4B, agit comme un régulateur majeur de la transition G1/S en ubiquitinant les cyclines D1, D2 et D3 phosphorylées, et module également les ligases Cul5-RING par la dégradation d’Elongin-C. Références associées : PMID:33854232, PMID:33854239, PMID:30166453
• CUL4B est nécessaire à l’ubiquitination de la cycline E (CCNE1/CCNE2) et assure une progression normale en phase G1, soulignant son rôle essentiel dans le contrôle du cycle cellulaire. Références associées : PMID:16322693, PMID:19801544
• Il régule la voie de signalisation mTORC1 de manière dépendante du protéasome par interaction avec MLST8, influençant la croissance, la taille et le métabolisme cellulaires. Références associées : PMID:18235224
• Avec CUL4A, CUL4B contribue à la biogenèse des ribosomes, ce qui souligne son rôle plus large dans les processus anaboliques cellulaires. Références associées : PMID:26711351
• CUL4B se localise à la fois dans le cytoplasme et dans le noyau, et subit des modifications post-traductionnelles, notamment une acétylation et une phosphorylation.
• Les mutations de CUL4B sont associées à une déficience intellectuelle liée à l’X, à une petite taille et à d’autres anomalies du développement.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux 1-152 acides aminés N-terminaux de CUL4B humain ; cette région peut être conservée entre les espèces, ce qui est cohérent avec la réactivité croisée humaine/murine observée.
• Pour le Western blot, utiliser des conditions réductrices standard et un contrôle de chargement (par exemple, GAPDH) afin de valider la spécificité ; la bande attendue est d’environ 104 kDa.
• Optimiser la dilution de l’anticorps primaire et les conditions d’incubation (par exemple, 1:500–1:2000 pour le WB) à l’aide de lysats cellulaires positifs tels que HeLa ou HEK293, et toujours inclure un contrôle négatif (par exemple, des lysats issus d’une extinction génique, si disponibles).
• En ELISA, envisager le revêtement avec l’immunogène recombinant ou la protéine purifiée, et titrer les concentrations des anticorps de capture et de détection afin d’obtenir des rapports signal/bruit optimaux.

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