Anticorps polyclonal anti-CTCF pour WB, IP, IF/ICC, IHC-P, ChIP, ELISA - P49711

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CTCF

• Le CTCF est une protéine à doigts de zinc liant l'ADN très conservée qui agit comme un régulateur architectural clé de l'organisation de la chromatine et de l'expression génique (PubMed:16949368, PubMed:18347100, PubMed:18654629). Références associées : PMID:16949368 PMID:18347100 PMID:18654629
• Il médie la formation de boucles de chromatine, ancre l'ADN à la lamina nucléaire et définit les limites entre les domaines chromatiniens actifs et hétérochromatiques en se liant aux isolants de chromatine (PubMed:18347100, PubMed:18654629, PubMed:19322193). Références associées : PMID:18347100 PMID:18654629 PMID:19322193
• Le CTCF participe à l'expression génique allèle-spécifique au niveau du locus génique imprimé IGF2/H19 et régule la réplication asynchrone de ce locus (PubMed:16107875, PubMed:16815976, PubMed:17827499). Références associées : PMID:16107875 PMID:16815976 PMID:17827499
• Il interagit préférentiellement avec l'ADN non méthylé, empêchant la propagation de la méthylation des CpG ; sa liaison est inhibée par la méthylation des CpG, reliant ainsi la méthylation de l'ADN à la structure de la chromatine (PubMed:18413740). Références associées : PMID:18413740
• Agit comme répresseur transcriptionnel sur les promoteurs MYC et BAG1, et comme activateur d'APP ; régule également le groupe de gènes APOA1/C3/A4/A5 et les gènes du CMH de classe II (PubMed:8649389, PubMed:9591631, PubMed:9407128, PubMed:18347100, PubMed:19322193). Références associées : PMID:8649389 PMID:9591631 PMID:9407128 PMID:18347100 PMID:19322193
• Le CTCF peut former des dimères, provoquant des modifications locales des histones (perte d'acétylation, gain de méthylation) et est nécessaire pour le positionnement des nucléosomes, la cohésion des chromatides sœurs et la localisation de la cohésine (PubMed:12191639, PubMed:18550811). Références associées : PMID:12191639 PMID:18550811
• Se localise dans le noyau, le nucléoplasme, les chromosomes et les centromères ; joue un rôle dans le recrutement de CENPE vers les régions péricentromériques / centromériques pendant la mitose (PubMed:26321640). Références associées : PMID:26321640
• Exprime largement dans les tissus humains, absent dans les spermatocytes primaires ; agit comme suppresseur de tumeur et est impliqué dans des troubles du développement (PubMed:12191639). Références associées : PMID:12191639

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Étant donné que l'immunogène correspond à la région N-terminale (aa 1-260) conservée chez l'homme, la souris et le rat, cet anticorps peut présenter une réactivité croisée avec ces espèces ; vérifiez-la dans vos types d'échantillons spécifiques.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC) et l'immunohistochimie (IHC-P), envisagez des protocoles de perméabilisation nucléaire et de démasquage antigénique pour améliorer le signal.
• En immunoprécipitation de chromatine (ChIP), l'anticorps cible des sites de liaison abondants du CTCF ; optimisez les conditions de réticulation et de cisaillement pour capturer des complexes protéine-ADN robustes.
• La taille de bande attendue en Western blot est d'environ 83 kDa ; validez avec des contrôles appropriés, car les modifications post-traductionnelles peuvent décaler la migration.
• Le ELISA peut être utilisé pour les tests de liaison à haut débit ; confirmez les tampons de revêtement et les systèmes de détection optimaux.

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