Anticorps polyclonal de lapin anti-CSRP3 - P50461

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CSRP3

• CSRP3, également connu sous le nom de protéine LIM cardiaque (CLP) ou protéine LIM musculaire (MLP), est un membre de la famille des protéines riches en cystéine et en glycine et contient deux domaines de liaison au zinc LIM, facilitant les interactions protéine-protéine.
• Agit comme un régulateur positif de la myogenèse en servant de cofacteur pour les facteurs de transcription bHLH myogéniques (MYOD1, MYOG, MYF6), améliorant leur liaison à l'ADN et favorisant l'expression de gènes spécifiques aux muscles.
• Dans les cardiomyocytes, joue un rôle structurel crucial en organisant les composants cytosoliques à la ligne Z, agissant comme une échafaudage qui ancre la calcineurine et permet la détection de l'étirement mécanique et la signalisation calcineurine-NFAT activée par le stress.
• Se lie directement aux filaments d'actine, les liant en faisceaux et les protégeant contre la dépolymérisation médiée par la cofiline. Module également de manière bidirectionnelle l'activité de CFL2, en l'augmentant ou en la réduisant selon le rapport CSRP3:CFL2.
  Références connexes :
  PMID:19752190
  PMID:24934443
• In vitro, inhibe l'activité de la protéine kinase C alpha (PKC/PRKCA), suggérant un rôle dans l'atténuation de la signalisation excessive du stress cardiaque.
  Références connexes :
  PMID:27353086
• Un isoforme alternatif (isoforme 2) est détecté dans le muscle strié, où il peut réguler l'organisation précoce des sarcomères et influencer négativement la différenciation des myotubes.
• Se localise au niveau subcellulaire dans le noyau, le cytoplasme et les lignes Z des sarcomères, cohérent avec des doubles rôles dans la régulation transcriptionnelle et l'organisation du cytosquelette.
• La phosphorylation et la coordination des ions métalliques sont des modifications post-traductionnelles prédites qui modulent probablement son activité et ses interactions.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène comprend presque la totalité du CSRP3 humain (aa 1-194), on s'attend donc à ce que l'anticorps polyclonal reconnaisse plusieurs épitopes et puisse détecter les deux isoformes.
• Pour le western blot, une bande prédominante autour de 21 kDa devrait apparaître dans les lysats de muscle cardiaque et squelettique d'humain, de souris ou de rat ; inclure des témoins positifs et négatifs appropriés.
• En immunohistochimie (IHC-P), testez les techniques standard de récupération d'antigène (par exemple, tampon citrate pH 6,0) et optimisez la dilution de l'anticorps primaire ; en raison de la localisation nucléaire/cytoplasmique, attendez-vous à un marquage dans les cardiomyocytes et les fibres musculaires à contraction lente.
• Pour l'immunofluorescence/ICC, envisagez un double marquage avec des marqueurs sarcomériques (par exemple, α-actinine) pour vérifier la localisation à la ligne Z ; la méthode de perméabilisation peut influencer la détection.
• Les applications ELISA peuvent bénéficier d'une étape de blocage adaptée à la matrice de l'échantillon ; les formats à antigène immobilisé ou sandwich peuvent être explorés.
• Comme pour tout anticorps polyclonal, une validation lot par lot est recommandée, et la réactivité croisée entre espèces doit être confirmée dans le système expérimental spécifique.

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