Anticorps polyclonal anti-CRYZ pour WB, ELISA - Q08257

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CRYZ

• CRYZ (zeta-crystalline) est une protéine multifonctionnelle qui possède à la fois des activités de stabilisation des ARNm et d'oxidoréductase enzymatique. Elle se lie aux éléments riches en AU (ARE) dans la région 3'-UTR des ARNm cibles pour améliorer leur stabilité, notamment les ARNm codant pour SLC12A1, les enzymes impliquées dans le catabolisme de la glutamine et la protéine antiapoptotique BCL2. Elle catalyse également la réduction des orthoquinones en présence de NADPH, ce qui suggère un rôle dans la détoxification des xénobiotiques et la protection contre le stress oxydatif. Références associées : PMID:17497241 PMID:20103721
• Pendant l'acidose métabolique, CRYZ contribue à l'augmentation adaptative de l'ammoniogenèse rénale et de la réabsorption transépithéliale de NH4+ en stabilisant les ARNm des enzymes du catabolisme de la glutamine et le co-transporteur SLC12A1 dans la branche ascendante épaisse médullaire rénale.
• CRYZ est principalement localisé dans le cytoplasme/cytosol, ce qui est cohérent avec ses rôles dans la stabilisation des ARNm et les réactions enzymatiques.
• Spécificité tissulaire : CRYZ est exprimée à des niveaux très faibles dans le cristallin, contrairement à son expression plus élevée dans d'autres tissus où elle intervient dans la régulation des ARNm et l'équilibre redox.
• Le gène CRYZ est soumis à l'épissage alternatif, et la protéine est sujette à des modifications post-traductionnelles incluant l'acétylation et la phosphorylation (comme indiqué dans les mots-clés UniProt), qui peuvent réguler son activité ou ses interactions.
• Poids moléculaire de la protéine : L'isoforme canonique a un poids moléculaire calculé d'environ 35,2 kDa (UniProt : 35 207 Da), bien que le fournisseur indique 35 kDa.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé était une protéine de fusion recombinante correspondant aux acides aminés 1-329 de la CRYZ humaine (NP_001123514.1), englobant la protéine entière. Cette conception peut permettre la détection de plusieurs isoformes, mais une validation pour des variants d'épissage spécifiques doit être réalisée.
• Cet anticorps est recommandé pour les applications Western blot (WB) et ELISA. Pour le WB, envisagez une plage de dilution de départ typique pour les anticorps polyclonaux (par exemple 1:500-1:2000) et validez-la dans votre système d'échantillons. Le poids moléculaire prédit est d'environ 35 kDa ; une bande proche de cette taille est attendue dans les lysats humains, de souris et de rat, bien que des modifications post-traductionnelles ou un épissage alternatif puissent modifier la migration.
• Étant donné que CRYZ est impliquée dans la stabilité des ARNm et la régulation redox, son expression peut être modulée par le stress acidotique, des conditions oxydatives ou d'autres stimuli. Envisagez d'utiliser des contrôles positifs appropriés (par exemple, des lignées cellulaires rénales en condition d'acidose) et d'inclure des contrôles de charge pour le WB quantitatif.
• Une réactivité croisée est rapportée pour l'homme, la souris et le rat, mais des variations de séquence spécifiques à l'espèce peuvent affecter l'affinité. Vérifiez les performances sur votre organisme modèle avec une expérience de titration préliminaire.

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