Anticorps polyclonal de lapin anti-CREB3 pour WB, IF/ICC, ELISA - O43889

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du CREB3

• CREB3 (Cyclic AMP-responsive element-binding protein 3), également connu sous le nom de LZIP ou LUMAN, est un facteur de transcription lié au réticulum endoplasmique (RE) appartenant à la famille CREB/ATF, caractérisé par un domaine d'activation transcriptionnelle N-terminal et un motif leucine zipper C-terminal.
• Il se lie directement à l'ADN au niveau des séquences CRE (5'-GTGACGT[AG][AG]-3') et C/EBP pour activer la transcription, jouant un rôle crucial dans la réponse aux protéines mal repliées (UPR) en favorisant la survie cellulaire lors du stress du RE. Références connexes : PMID:10984507, PMID:15845366, PMID:16940180
• Lors d'un stress du RE, CREB3 subit une protéolyse intramembranaire régulée (RIP), libérant son fragment N-terminal qui transloque dans le noyau pour activer les gènes cibles de l'UPR tels que HERPUD1.
• À l'échelle subcellulaire, CREB3 se localise principalement à la membrane du réticulum endoplasmique et à l'appareil de Golgi dans les cellules au repos, avec une accumulation nucléaire et cytoplasmique de la forme clivée active après stimulation.
• En plus de l'UPR, CREB3 régule positivement la chimiotaxie des leucocytes induite par LKN-1/CCL15 et est impliqué dans la prolifération, la migration et la différenciation cellulaires, suggérant des rôles suppresseurs de tumeur dans certains contextes. Références connexes : PMID:15001559, PMID:17296613, PMID:19779205
• Dans la pathogenèse microbienne, CREB3 contribue à l'expression des protéines du VIH-1, à la suppression tumorale médiée par la protéine core du VHC et à la latence du HSV-1 en séquestrant le facteur cellulaire hôte HCFC1 à la membrane du RE dans les neurones sensoriels.
• CREB3 est exprimé de manière ubiquitaire dans les tissus, avec des niveaux relativement plus élevés dans les cellules dendritiques, et son activité transcriptionnelle est finement régulée par des interactions avec les HDAC et des cofacteurs tels que CREBZF.

Conseils expérimentaux et techniques

• Cet anticorps polyclonal a été élevé contre un immunogène couvrant les acides aminés 1 à 230 du CREB3 humain ; il peut détecter à la fois la forme pleine longueur et les produits de clivage N‑terminaux.
• Pour le Western blotting (WB), le poids moléculaire prédit est d'environ 41 kDa, mais des bandes supplémentaires correspondant aux formes traitées peuvent apparaître ; utilisez des lysats cellulaires induits par un stress du RE comme témoins positifs.
• Dans les expériences d'immunofluorescence (IF/ICC), la perméabilisation et l'induction du stress du RE (par exemple avec la tunimycine ou la thapsigargine) peuvent améliorer la détection du signal nucléaire.
• Pour l'ELISA, validez l'anticorps avec l'immunogène recombinant ou des tests basés sur des cellules, et envisagez de le coupler avec un anticorps de détection pour le développement d'un ELISA sandwich.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec le CREB3 de souris et de rat, permettant des études translationnelles sur des modèles rongeurs ; optimisez les dilutions et les conditions de blocage pour chaque espèce.
• Incluez toujours des témoins négatifs appropriés (par exemple, des échantillons avec knockdown ou knockout) pour confirmer la spécificité.

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