Anticorps polyclonal de lapin anti-CRACR2A pour WB, IHC-P, ELISA - Q9BSW2

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la CRACR2A

• CRACR2A, également connue sous le nom de protéine contenant un domaine de liaison au calcium EF-hand 4B (EFCAB4B) ou protéine apparentée à Ras Rab-46 (RAB46), est une protéine de liaison au calcium avec activité GTPase qui joue un double rôle dans l'entrée de calcium dépendante des réserves (SOCE) et le trafic intracellulaire. Références associées : PMID:27016526
• Dans les lymphocytes T, la CRACR2A fonctionne comme un capteur cytoplasmique du calcium qui facilite le regroupement d'ORAI1 et de STIM1 au niveau des jonctions réticulum endoplasmique-membrane plasmique, favorisant l'activation des canaux CRAC. Suite à l'entrée de calcium, elle se dissocie du complexe pour réguler la stabilité du canal. Références associées : PMID:27016526
• En tant que GTPase Rab, la CRACR2A médie le transport rétrograde des corps de Weibel-Palade (WPB) vers le centre organisateur des microtubules (MTOC) dans les cellules endothéliales en réponse à une stimulation par l'histamine, agissant de manière indépendante du calcium. Références associées : PMID:31092558
• La CRACR2A fonctionne également comme une protéine adaptatrice de la dynéine régulée par le calcium, activant le transport médié par la dynéine et régulant le trafic endosomal du CD47. Références associées : PMID:30814157
• Elle fait le lien entre les voies de signalisation du TCR en se localisant à la synapse immunologique lors de l'activation des lymphocytes T, où elle interagit avec VAV1 pour activer les cascades de signalisation en aval Ca2+-NFAT et JNK. Références associées : PMID:27016526
• Au niveau subcellulaire, la CRACR2A se trouve dans le cytoplasme, à la membrane plasmique, dans l'appareil de Golgi, le réseau trans-Golgien, et est associée aux vésicules et au centre organisateur des microtubules. Sa localisation change en fonction de l'état d'activation et du type cellulaire.
• L'expression tissulaire comprend les lignées de lymphocytes T comme Jurkat et les cellules endothéliales, avec une localisation spécifique aux corps de Weibel-Palade dans les cellules endothéliales. Références associées : PMID:25475730, PMID:31092558, PMID:27016526, PMID:30814157
• La protéine contient des domaines EF-hand pour la liaison du calcium, un domaine GTPase, et subit une prénylation (comme indiqué par les mots-clés), suggérant une association membranaire. Plusieurs isoformes existent en raison d'un épissage alternatif.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à la région N-terminale (acides aminés 1-200) de la CRACR2A humaine, qui peut cibler des épitopes conservés entre les isoformes. Pensez à vérifier la détection spécifique de l'isoforme dans votre système expérimental.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 83 kDa. Lors de l'analyse de la CRACR2A endogène, soyez attentif aux éventuelles modifications post-traductionnelles ou variants d'épissage qui pourraient modifier la migration.
• En immunohistochimie (IHC-P), les conditions de démasquage antigénique doivent être optimisées pour le tissu spécifique et la liaison de l'anticorps. Validez les profils de marquage en utilisant des contrôles positifs (par exemple, des tissus riches en lymphocytes T) et négatifs appropriés.
• L'anticorps présente une réactivité croisée avec des échantillons de souris selon les spécifications du fournisseur, mais nous recommandons de valider la spécificité dans les tissus ou lignées cellulaires de souris avant utilisation.
• Pour les applications ELISA, envisagez d'utiliser un système de détection secondaire compatible avec les anticorps polyclonaux de lapin ; titrez l'anticorps pour déterminer la concentration de travail optimale.

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