Anticorps polyclonal de lapin anti-CPS1 pour WB, IF/ICC, ELISA - P31327

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CPS1

• CPS1 (Carbamoyl-phosphate synthase [ammonia], mitochondrial) est une enzyme clé du cycle de l'urée qui catalyse la synthèse dépendante de l'ATP du phosphate de carbamoyle à partir d'ammoniac et de bicarbonate, essentielle pour la détoxification de l'ammoniac chez les animaux uréotéliques.
• La protéine est principalement exprimée dans le foie et l'intestin grêle, ce qui est cohérent avec son rôle central dans le métabolisme azoté.
• CPS1 se localise principalement dans la matrice mitochondriale, mais a également été détectée dans le noyau, le nucléole et la membrane cellulaire, ce qui suggère des fonctions non canoniques supplémentaires.
• Des modifications post-traductionnelles incluant l'acétylation, la phosphorylation et la glycosylation ont été rapportées, qui peuvent réguler l'activité enzymatique ou la localisation.
• CPS1 est une enzyme allostérique et un membre de la famille des ligases, contenant des sites de liaison à l'ATP critiques pour sa fonction catalytique.
• L'épissage alternatif produit plusieurs isoformes, et des mutations de CPS1 causent le déficit en carbamoyl phosphate synthétase I, une maladie grave du cycle de l'urée.
• Une structure 3D résolue apporte des informations sur l'architecture en domaines de l'enzyme et ses mécanismes de régulation.
• La protéine mature a un poids moléculaire d'environ 165 kDa (UniProt : 164 939 Da).

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène couvre la région centrale (aa 750-970) de la CPS1 humaine, ciblant une zone potentiellement conservée entre les espèces ; vérifiez la réactivité croisée dans votre système d'échantillon spécifique.
• Pour le Western blot (WB), attendez une bande autour de 165 kDa ; utilisez des marqueurs de poids moléculaire appropriés et envisagez des contrôles de chargement tels que GAPDH ou la bêta-actine pour la normalisation.
• Pour l'immunofluorescence / immunocytochimie (IF/ICC), optimisez la fixation (par exemple 4 % de PFA) et la perméabilisation (par exemple 0,1 % de Triton X-100) pour détecter la localisation mitochondriale ; utilisez une coloration croisée avec des marqueurs mitochondriaux si nécessaire.
• Pour les applications ELISA, titrez l'anticorps et utilisez un antigène de revêtement adapté ; l'immunogène recombinant peut servir de contrôle positif.

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