Anticorps monoclonal de lapin anti-CPS1 pour WB, IHC-P, ELISA - P31327

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la CPS1

• La CPS1 (carbamoyl-phosphate synthetase I) est une enzyme mitochondriale qui catalyse la première étape engagée du cycle de l’urée, en convertissant l’ammoniac et le bicarbonate en carbamoyl phosphate.
• L’enzyme joue un rôle essentiel dans la détoxification de l’excès d’ammoniac chez les animaux uréotéliques, le cycle de l’urée constituant la principale voie d’élimination de l’azote.
• La CPS1 est principalement exprimée dans le foie et l’intestin grêle, ce qui est cohérent avec son rôle central dans l’élimination de l’ammoniac et le catabolisme des acides aminés.
• La localisation subcellulaire est principalement mitochondriale, mais la CPS1 a également été détectée dans le noyau, le nucléole et au niveau de la membrane cellulaire, ce qui suggère d’éventuelles fonctions ne relevant pas du cycle de l’urée.
• De multiples modifications post-traductionnelles ont été rapportées, notamment l’acétylation, la phosphorylation et la glycosylation, susceptibles de réguler l’activité enzymatique ou la distribution subcellulaire.
• L’épissage alternatif génère différentes isoformes, et les mutations du gène CPS1 sont associées au déficit en carbamoyl-phosphate synthétase I, une maladie grave du cycle de l’urée.
• La CPS1 appartient à la superfamille des protéines présentant un repliement de type ATP-grasp et fonctionne comme une ligase, nécessitant de l’ATP et une activation allostérique par le N-acétylglutamate.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux résidus 1356–1482 de la CPS1 humaine, une région située dans le domaine C-terminal ; envisagez de vérifier que cet épitope est accessible dans la conformation native de votre échantillon lors de l’utilisation d’essais non dénaturants.
• Pour le Western blot, une bande d’environ 165 kDa est attendue ; validez la spécificité dans des lysats de tissus pertinents (par exemple, le foie) et incluez des marqueurs de poids moléculaire appropriés.
• En IHC-P, les conditions de récupération antigénique doivent être optimisées pour la détection mitochondriale et nucléaire ; validez les profils de coloration à l’aide de contrôles tissulaires connus.
• Pour l’ELISA, une association avec un anticorps de capture ciblant un épitope différent peut être nécessaire ; tenez compte de la réactivité croisée avec la CPS1 de souris et de rat lors de la conception des essais.

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