Anticorps monoclonal de lapin anti-CPS1 pour WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P31327

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la CPS1

• La CPS1, également appelée carbamoyl-phosphate synthétase I, est une enzyme mitochondriale qui catalyse la première étape engagée du cycle de l’urée, en convertissant l’ammoniac en carbamoyl phosphate, ce qui est essentiel à la détoxification de l’ammoniac chez les animaux uréotéliques.
• Elle joue un rôle essentiel dans l’élimination de l’excès d’ammoniac des cellules, principalement dans le foie et l’intestin grêle, où elle est fortement exprimée.
• La protéine se localise dans la matrice mitochondriale, mais a également été détectée dans le noyau, le nucléole et la membrane cellulaire, ce qui suggère des fonctions non canoniques supplémentaires.
• La CPS1 subit diverses modifications post-traductionnelles, notamment l’acétylation et la phosphorylation, et présente un épissage alternatif susceptible de réguler son activité ou sa localisation.
• En tant qu’enzyme allostérique liant l’ATP, elle appartient à la famille des ligases et constitue un composant clé du cycle de l’urée, les mutations étant associées à des variants pathologiques.
• La protéine mature a un poids moléculaire d’environ 165 kDa, ce qui correspond à son précurseur de 164939 Da après clivage du peptide de transit mitochondrial.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• Pour le Western blot, la détection de la cible à environ 165 kDa nécessite une concentration de gel appropriée (par exemple, 6 à 8 % de SDS-PAGE) ainsi que des temps de transfert prolongés en raison du poids moléculaire élevé.
• Dans les protocoles d’immunofluorescence (IF-P), les conditions optimales de fixation et de perméabilisation doivent être déterminées afin de préserver la structure mitochondriale tout en permettant l’accès de l’anticorps.
• Pour l’immunohistochimie (IHC-P), le pH et la méthode de récupération antigénique doivent être validés ; les coupes de tissus du foie et de l’intestin grêle constituent des contrôles positifs appropriés en raison de la spécificité tissulaire.
• Comme l’immunogène est un peptide synthétique correspondant aux résidus 100 à 200, la spécificité peut être confirmée par des essais de compétition avec le peptide ou par une analyse Western blot utilisant des lysats de cellules knock-out pour CPS1, si disponibles.

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