Anticorps polyclonal de lapin Anti-COX8A pour WB et ELISA - P10176

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la sous-unité 8A de la cytochrome c oxydase

• Le gène COX8A code pour la sous-unité 8A de la cytochrome c oxydase, un polypeptide codé par le noyau du complexe IV de la chaîne respiratoire mitochondriale (également appelé polypeptide VIII foie/cœur de la cytochrome c oxydase et COX8-2).
• En tant que composant de la cytochrome c oxydase (complexe IV), il catalyse la réduction terminale de l'oxygène en eau dans la chaîne de transport d'électrons, couplant le transfert d'électrons à la translocation de protons à travers la membrane mitochondriale interne pour générer la synthèse d'ATP.
• Le gène COX8A appartient à une famille de sous-unités codées par le noyau qui modulent structurellement le cœur catalytique du complexe IV ; des isoformes alternatives peuvent provenir de gènes distincts comme COX8C.
• La protéine se localise dans la membrane interne mitochondriale via une hélice transmembranaire ; elle est synthétisée sous forme de précurseur avec un peptide de transit N-terminal qui est clivé lors de l'import mitochondrial pour obtenir la forme mature d'environ 8 kDa.
• L'ubiquitination (conjugaison Ubl) a été identifiée comme une modification post-traductionnelle, régulant potentiellement la stabilité ou l'assemblage de COX8A dans le complexe.
• Les mutations de COX8A sont liées à des maladies mitochondriales primaires, notamment le déficit nucléaire type 15 du complexe mitochondrial IV (MC4DN15), ce qui souligne son rôle essentiel dans la phosphorylation oxydative.
• Largeement exprimé dans tous les tissus humains, COX8A soutient la fonction de base de la respiration mitochondriale dans divers types cellulaires.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène correspond aux 69 acides aminés N-terminaux de la COX8A humaine ; il est recommandé d'utiliser des lysats enrichis en mitochondries pour améliorer la sensibilité de détection de cette protéine membranaire interne de faible abondance.
• Pour le Western blotting, utilisez un gel à pourcentage élevé (par exemple 15 % ou un gel à gradient) adapté à la séparation des protéines d'environ 8 kDa, et validez la bande par rapport au poids moléculaire prévu (UniProt : 7579 Da) avec des marqueurs mitochondriaux.
• Pour les applications ELISA, la nature polyclonale permet la reconnaissance de multiples épitopes ; réalisez des titrations en échiquier pour déterminer les concentrations optimales d'anticorps et d'antigène pour le revêtement.
• La réactivité croisée avec l'humain et la souris est confirmée ; pour d'autres espèces, alignez la séquence de l'immunogène avec la protéine cible pour prévoir la réactivité avant utilisation expérimentale.
• Compte tenu de la localisation mitochondriale, un prétraitement des échantillons avec des détergents doux peut améliorer l'accessibilité des épitopes, bien que des tests empiriques soient recommandés.

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