Anticorps monoclonal de lapin anti-COX5B pour WB - P10606

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : fonction et localisation de la COX5B

• La COX5B (sous-unité 5B de la cytochrome c oxydase) est une sous-unité codée par le génome nucléaire du complexe mitochondrial IV (cytochrome c oxydase), l’enzyme terminale de la chaîne de transport des électrons.
• Elle est un composant du complexe multimérique de la cytochrome c oxydase, qui catalyse la réduction de l’oxygène moléculaire en eau en couplant cette réaction au pompage de protons à travers la membrane mitochondriale interne.
• La protéine COX5B est synthétisée avec un peptide de transit mitochondrial, qui est clivé après son importation dans la mitochondrie, produisant une sous-unité mature qui s’intègre à la membrane interne.
• Sa localisation subcellulaire est limitée à la membrane mitochondriale interne, où elle contribue à l’intégrité structurelle et fonctionnelle du complexe IV.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l’acétylation, et la protéine mature contient un site de liaison au zinc, comme l’indique la présence d’un ion zinc dans la structure cristalline.
• Le poids moléculaire théorique de la COX5B humaine mature est d’environ 13,7 kDa, ce qui concorde avec la bande observée à 13 kDa sur SDS-PAGE.
• En tant que sous-unité centrale de la chaîne respiratoire, la COX5B est essentielle à la phosphorylation oxydative et à la production efficaces d’ATP, et son expression est souvent utilisée comme marqueur de la masse et de l’activité mitochondriales.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène couvre les acides aminés 29 à 129 de la COX5B humaine, ce qui correspond à la protéine mature clivée dépourvue du peptide de ciblage mitochondrial, générant vraisemblablement des anticorps qui reconnaissent la forme endogène mature.
• Pour le Western blot, une bande d’environ 13 kDa est attendue dans les lysats de tissus humains, murins et de rat riches en mitochondries (par exemple, cœur, muscle squelettique, foie). Utiliser un échantillon enrichi en fraction mitochondriale pour une détection optimale.
• Pour l’immunohistochimie (IHC-P) et l’immunofluorescence (IF/ICC), la coloration devrait présenter un motif cytoplasmique ponctué, compatible avec une localisation mitochondriale. Un contre-marquage avec un marqueur mitochondrial est recommandé pour la validation.
• Dans les expériences d’immunoprécipitation (IP), l’anticorps peut coprécipiter d’autres sous-unités du complexe IV ; il est conseillé d’utiliser des détergents doux afin de préserver l’intégrité du complexe natif.
• La réactivité en ELISA peut être utilisée pour la détection quantitative de la COX5B dans des lysats cellulaires ou tissulaires, mais les performances doivent être validées avec des étalons connus.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat a été confirmée, mais il convient toujours de vérifier la réactivité spécifique à l’espèce dans votre propre système expérimental en raison de variations potentielles de séquence.

CamelBio : votre plateforme d’approvisionnement tout-en-un

CamelBio accompagne les fabricants de produits diagnostiques et les laboratoires de recherche grâce à un portefeuille complet de matières premières pour le diagnostic in vitro (IVD), comprenant des anticorps monoclonaux validés tels que ce mAb de lapin anti-COX5B destiné à la recherche sur les maladies mitochondriales et métaboliques. Nous proposons des quantités en vrac, le développement d’anticorps personnalisés et des réactifs complémentaires afin de simplifier le développement de vos essais. Collaborez avec nous pour obtenir des réactifs ciblant des molécules rares, optimiser votre approvisionnement et accélérer votre passage du concept à la clinique.