Anticorps Monoclonal Anti-COX5B pour WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P10606

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation du COX5B

• Le COX5B, également connu sous le nom de sous-unité 5B de la cytochrome c oxydase ou COXVB, est un composant codé par le noyau du complexe IV (cytochrome c oxydase) de la chaîne de transport des électrons mitochondriale.
• Il catalyse la réduction terminale de l'oxygène moléculaire en eau, couplant le transfert d'électrons au pompage des protons à travers la membrane mitochondriale interne pour entraîner la synthèse d'ATP.
• La protéine se localise spécifiquement à la membrane mitochondriale interne, où elle s'associe à d'autres sous-unités de l'holoenzyme cytochrome c oxydase.
• Conjointement avec les complexes II et III, le COX5B contribue à la chaîne respiratoire qui transfère les électrons du NADH et du succinate vers l'oxygène, établissant un gradient électrochimique.
• Le site actif de la cytochrome c oxydase comprend l'hème A3 et le cuivre B (CuB), le COX5B jouant un rôle structurel dans le maintien de l'intégrité et de la fonction du centre binucléaire.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, et la protéine lie un ion zinc (liaison métallique), comme identifié par la protéomique et le séquençage direct des protéines.
• La protéine mature (après clivage du peptide de transit mitochondrial) a un poids moléculaire d'environ 14 kDa, correspondant à la majeure partie de la sous-unité mature.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'immunogène couvre les acides aminés 29 à 129 du COX5B humain, une région correspondant à la protéine mature après élimination de la séquence de ciblage mitochondriale ; cette conception améliore la reconnaissance de la forme endogène traitée.
• Pour le Western blot (WB), envisagez d'utiliser des conditions réductrices et des extraits de protéines enrichis en mitochondries pour maximiser la détection de la bande d'environ 14 kDa.
• En immunofluorescence (IF/ICC) et en immunohistochimie (IHC-P), la coloration du COX5B présente généralement un motif mitochondrial ponctué ; validez avec des marqueurs d'organites pour confirmer la localisation.
• L'anticorps réagit de manière croisée avec le COX5B de souris et de rat ; vérifiez la réactivité dans les lysats cellulaires ou tissulaires des espèces concernées, car l'homologie de séquence dans la région de l'immunogène peut varier.
• Pour les applications ELISA, optimisez les conditions de revêtement et les dilutions d'anticorps en utilisant du COX5B recombinant ou des fractions mitochondriales d'échantillons humains, de souris ou de rat.
• En tant qu'anticorps monoclonal, il convient pour des performances cohérentes d'un lot à l'autre ; néanmoins, chaque nouvelle application doit être titrée et validée dans le système d'échantillon prévu.

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