Anticorps polyclonal de lapin anti-COX5A pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P20674

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du COX5A

• Le gène COX5A code pour la sous-unité 5A de la cytochrome c oxydase mitochondriale, également connue sous le nom de polypeptide Va de la cytochrome c oxydase.
• C'est un composant essentiel du complexe IV (cytochrome c oxydase), l'enzyme terminale de la chaîne de transport des électrons mitochondriale.
• Le complexe IV catalyse la réduction de l'oxygène moléculaire en eau, en utilisant des électrons provenant du cytochrome c réduit, contribuant ainsi au gradient de protons qui stimule la synthèse d'ATP.
• Cette sous-unité est ancrée dans la membrane interne mitochondriale, avec un peptide de signal dirigeant son importation dans l'organite.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation, la phosphorylation et la conjugaison à l'ubiquitine, suggérant des rôles régulateurs dans la fonction mitochondriale.
• Les mutations du gène COX5A sont liées à des maladies mitochondriales primitives, soulignant son rôle essentiel dans le métabolisme énergétique cellulaire.
• La protéine contient des centres hème A et cuivre comme cofacteurs, essentiels pour le transfert d'électrons au sein du complexe IV.
• Le COX5A a un poids moléculaire mature d'environ 17 kDa, ce qui est cohérent avec sa détection par western blot.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le western blot (WB), une bande prédominante proche de 17 kDa est attendue dans les échantillons riches en mitochondries ; optimisez les contrôles de chargement et validez dans les tissus ou lignées cellulaires appropriés.
• Lors de la réalisation d'une immunohistochimie (IHC-P), envisagez une retrieval de l'antigène induite par la chaleur utilisant un tampon citrate ou EDTA et confirmez la spécificité de la coloration avec des contrôles appropriés.
• Pour l'immunofluorescence (IF/ICC), perméabilisez les cellules pour accéder au compartiment mitochondrial ; une co-coloration avec un marqueur mitochondrial peut aider à vérifier la localisation.
• Dans les applications ELISA, cet anticorps polyclonal peut être utilisé comme réagent de capture ou de détection ; les conditions de l'essai telles que la concentration d'encrassement et le blocage doivent être optimisées individuellement.
• La réactivité croisée rapportée avec la souris et le rat permet des études translationnelles, mais la reconnaissance de l'épitope spécifique à l'espèce doit être confirmée dans votre système modèle.
• En tant qu'anticorps polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre n'est pas garantie ; pour les essais quantitatifs ou réglementés, validez chaque nouveau lot par rapport aux performances précédentes.

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