Anticorps monoclonal lapin anti-COX IV pour WB, IHC-P, ELISA - P13073

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la COX IV

• La sous-unité 4 isoforme 1 de la cytochrome c oxydase (COX IV-1) est une sous-unité codée par le noyau du complexe IV (cytochrome c oxydase), l'enzyme terminale de la chaîne de transport d'électrons mitochondriale.
• Elle joue un rôle essentiel dans la phosphorylation oxydative en contribuant à l'assemblage et à la régulation de l'holoenzyme, qui catalyse la réduction de l'oxygène moléculaire en eau.
• L'enzyme couple le transfert d'électrons du cytochrome c vers l'oxygène à la translocation de protons à travers la membrane interne mitochondriale, générant le gradient de protons indispensable à la synthèse d'ATP.
• La COX IV-1 est codée par le gène COX4I1 et est exprimée de manière ubiquitaire dans les tissus humains, avec un poids moléculaire d'environ 19,5 kDa pour la protéine mature.
• La protéine est ancrée dans la membrane interne mitochondriale et est synthétisée avec un peptide de transit clivable qui dirige son import dans la mitochondrie.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation et la phosphorylation, qui peuvent moduler l'activité et l'assemblage du complexe IV.
• Les mutations de COX4I1 sont liées à la déficience du complexe IV mitochondrial, type nucléaire 16 (MC4DN16), une pathologie multisynergique sévère.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène utilisé (peptide N-terminal dans la région des acides aminés 1–100) suggère une reconnaissance d'épitope dans une région conservée chez l'homme, la souris et le rat, ce qui explique la réactivité croisée observée. Prenez ce point en compte lors de la conception de tests de détection spécifiques d'isoformes.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit de la COX IV est d'environ 20 kDa ; validez la détection en utilisant des lysats de contrôle positifs appropriés (par exemple, fractions mitochondriales de HeLa, HEK293 ou de foie de rongeur).
• En immunohistochimie (paraffine), appliquez des méthodes standard de récupération d'antigène (tampon citrate, pH 6,0 ou EDTA, pH 9,0) et un blocage de la peroxydase endogène ; les schémas d'expression spécifiques aux tissus peuvent nécessiter une optimisation.
• Lors de la réalisation d'un ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection pour la COX IV native ou recombinante ; la réactivité croisée avec l'holocomplexe du complexe IV ou ses sous-assemblages peut influencer la conception du test — une validation empirique est recommandée.
• Incluez toujours des contrôles adaptés à l'espèce étudiée et, si vous étudiez des modèles pathologiques, confirmez la présence de mutations susceptibles d'altérer l'accessibilité de l'épitope.

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