Anticorps monoclonal de lapin anti-COPB2 pour WB, IF/ICC, ELISA - P35606

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de COPB2

• COPB2 code pour la sous-unité bêta'-COP du coatomère (protéine de revêtement bêta', p102), un composant central du complexe coatomère COPI impliqué dans le trafic vésiculaire intracellulaire.
• Le complexe coatomère se lie aux motifs dilysine et s'associe de manière réversible aux vésicules non recouvertes de clathrine du Golgi, médiant le transport biosynthétique des protéines du RE à travers le Golgi vers le réseau trans-Golgi.
• COPB2 est essentiel pour le bourgeonnement du Golgi et le transport rétrograde du Golgi vers le RE des protéines marquées par dilysine, maintenant l'intégrité structurelle du Golgi et régulant le traitement, l'activité et le recyclage endocytique des récepteurs LDL.
• COPB2 fonctionne comme une protéine de liaison sélective (RACK) pour la protéine kinase C de type epsilon, reliant le trafic membranaire à la signalisation cellulaire via une liaison dépendante du GTP aux membranes du Golgi.
• La protéine se localise principalement dans le cytoplasme, la membrane de l'appareil de Golgi et les membranes des vésicules recouvertes de COPI, soulignant son rôle dans la formation des vésicules COPI et le tri du cargo.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'acétylation et la phosphorylation, qui peuvent moduler l'assemblage du coatomère, sa stabilité, ou ses interactions avec le cargo et les facteurs régulateurs.
• Les mutations de COPB2 sont associées à la microcéphalie primaire (MCPH19) et à l'ostéoporose, mettant en évidence ses rôles essentiels dans la division cellulaire et l'homéostasie osseuse.
• La protéine contient des domaines à répétitions WD, permettant des interactions protéine-protéine cruciales pour l'intégrité et la fonction du complexe coatomère.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène (aa 657-906) couvre la région C-terminale à répétitions WD ; considérez que l'anticorps peut reconnaître des motifs structuraux conservés lors de l'évaluation de la réactivité croisée entre espèces.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est de 102 kDa ; utilisez un pourcentage de gel approprié (par exemple, SDS-PAGE 8%) et optimisez les conditions de transfert pour les protéines de haut poids moléculaire.
• En immunofluorescence/ICC, attendez-vous à un marquage de type périnucléaire, semblable au Golgi ; un co-marquage avec un marqueur du cis-Golgi (par exemple, GM130) est recommandé pour la validation.
• Pour l'ELISA, utilisez l'immunogène recombinant comme contrôle positif et standardisez les conditions du test avec des tampons de blocage et de lavage appropriés.
• Vérifiez la spécificité de l'anticorps en utilisant des lysats cellulaires avec knockout ou knockdown de COPB2 si disponibles, car COPB2 est essentiel et sa déplétion peut affecter la viabilité cellulaire.
• Pour préserver l'activité de l'anticorps, aliquotez et stockez à -20°C ou moins ; évitez les cycles répétés de congélation-décongélation et les expositions prolongées à température ambiante (expédié sur sac de glace).

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