PolymAb® de lapin anti-Connexine 43 pour WB, IF/ICC, IF-P, ELISA - P17302

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Connexine 43 (GJA1)

• La protéine jonction gap alpha-1, également appelée Connexine-43 (Cx43), est codée par le gène GJA1. C'est le composant structurel des jonctions gap, formant des canaux intercellulaires qui permettent l'échange direct d'ions, de métabolites et de petites molécules de signalisation entre cellules adjacentes.
• Les canaux fonctionnels sont des connexons hexamériques homotypiques et hétérotypiques, régulés par la tension transjonctionnelle. La Cx43 contribue à divers processus physiologiques, notamment le recyclage du potassium dans la cochlée (audition), la régulation de la capacité fonctionnelle de la vessie via la sensibilisation aux stimuli cholinergiques, ainsi que la conduction myocardique ventriculaire correcte et la morphogenèse cardiaque.
• C'est un régulateur négatif de la croissance cellulaire par modulation de l'expression et de la localisation de NOV.
• Médiateur essentiel de la signalisation immunitaire innée intercellulaire : lors d'une infection virale, les canaux Cx43 translocalisent les seconds messagers 2',3'-cGAMP et 2',5'-oligoadénylates (2-5A) des cellules infectées vers les macrophages et les cellules voisines non infectées, amplifiant ainsi la réponse immunitaire antivirale. Références associées : PMID:24077100 PMID:31992625 PMID:40010341
• Au niveau sous-cellulaire, la Cx43 est majoritairement localisée au niveau de la membrane cellulaire et des plaques de jonction gap, et est également présente dans le réticulum endoplasmique.
• Expression tissulaire : abondante dans les disques intercalares du muscle cardiaque, la cochlée fœtale et les kératinocytes épidermiques.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation, l'acétylation, la S-nitrosylation et l'ubiquitination ; celles-ci modifient l'assemblage du canal, sa régulation et son renouvellement. La Cx43 est associée à des pathologies telles que la dysplasie oculodentodigitale, la kératodermie palmoplantaire et les cataractes congénitales.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 300 à 382 de la queue C-terminale de la Cx43 humaine. Cette région est cytoplasmique et contient plusieurs sites de phosphorylation régulateurs ; l'anticorps peut donc reconnaître plusieurs phospho-isoformes ou la Cx43 totale selon l'état de la protéine cible.
• Pour le Western blot (WB), une bande principale d'environ 43 kDa est attendue ; cependant, on sait que la Cx43 se présente sous forme de plusieurs bandes du fait de sa phosphorylation, qui peuvent être séparées par une préparation d'échantillon et une électrophorèse sur gel minutieuses.
• En immunofluorescence (IF/ICC, IF-P), un marquage membraneux ponctué typique des plaques de jonction gap doit être observé. Les conditions de perméabilisation et de fixation peuvent nécessiter une optimisation pour le type de cellule ou de tissu spécifique étudié.
• Pour les applications ELISA, envisagez d'utiliser une protéine Cx43 recombinante ou un peptide comprenant la séquence de l'immunogène comme contrôle positif pour valider la liaison de l'anticorps.

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