Anticorps monoclonal lapin anti facteur H du complément pour WB, ELISA - P08603

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du facteur H du complément

• Le facteur H du complément (CFH), également appelé facteur H 1, est une glycoprotéine de 139 kDa principalement sécrétée par le foie, et dans une moindre mesure par les monocytes, les fibroblastes, les cellules endothéliales et l'épithélium pigmenté rétinien.
• En tant qu'inhibiteur soluble majeur de la voie alternative du complément, le CFH prévient l'activation incontrôlée du complément en se liant aux surfaces cellulaires du soi, accélérant la décomposition de la C3 convertase (C3bBb) en phase liquide et liée à la surface. Références associées : PMID:19503104 PMID:21317894 PMID:26700768
• Le CFH agit comme cofacteur pour le clivage protéolytique du C3b en iC3b médié par le facteur I du complément, inactivant ainsi de manière irréversible la boucle d'amplification centrale de la cascade du complément. Références associées : PMID:18252712 PMID:23332154 PMID:28671664
• Au-delà de la régulation du complément, le CFH interagit avec le récepteur intégrine CR3 (ITGAM) sur les neutrophiles pour favoriser l'adhésion et la phagocytose des pathogènes, reliant le contrôle du complément aux réponses des cellules immunitaires innées. Références associées : PMID:20008295 PMID:9558116
• Pendant l'infection à Plasmodium falciparum dans l'intestin moyen du moustique, le CFH se lie à la surface des gamétocytes et protège le parasite de la mort médiée par la voie alternative du complément, soulignant son rôle dans les interactions hôte-pathogène.
• Le CFH contient plusieurs domaines sushi à répétition consensus courte (SCR) qui médient ses fonctions de liaison aux ligands, et subit des modifications post-traductionnelles incluant la glycosylation, la sulfation et la formation de ponts disulfure.
• Les mutations ou polymorphismes du gène CFH sont associés à la dégénérescence maculaire liée à l'âge (DMLA), au syndrome hémolytique et urémique atypique (SHUa) et à d'autres pathologies liées au complément, soulignant son importance clinique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique couvrant les acides aminés 100 à 200 des domaines SCR du CFH ; il faut considérer que l'anticorps peut reconnaître à la fois les formes natives et dénaturées dans des conditions réductrices et non réductrices, mais une validation dans le système d'échantillon cible est recommandée.
• Pour le Western blot, une bande d'environ 139 kDa est attendue dans des conditions réductrices ; utilisez des contrôles positifs appropriés (par exemple, lysat de foie humain ou sérum) et des marqueurs de poids moléculaire.
• L'anticorps est validé pour l'ELISA ; lors de la conception d'un ELISA sandwich, testez différentes paires d'anticorps de capture / de détection et incluez des contrôles de matrice pertinents.
• La réactivité croisée est rapportée pour l'homme ; pour d'autres espèces, il convient de vérifier l'homologie de séquence et une vérification expérimentale est conseillée.
• Le facteur H du complément est abondant dans le sérum ; envisagez des stratégies de dilution des échantillons et de blocage pour minimiser les problèmes de bruit de fond élevé dans les dosages basés sur le sérum.

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