Anticorps monoclonal de lapin anti-facteur B du complément (CFB) pour WB, IF/ICC, ELISA - P00751

Spécifications et paramètres essentiels du produit

Contexte biologique : fonction et localisation du facteur B du complément (CFB)

• Le CFB est un composant essentiel de la voie alterne du complément, servant de précurseur à la sérine protéase qui forme les convertases C3 et C5. Références associées : PMID:3638964, PMID:624565, PMID:6554279
• Après clivage par le facteur D (CFD), le CFB génère le fragment catalytique Bb, qui s’associe au C3b pour former la convertase C3 C3bBb, puis la convertase C5 après liaison à un autre C3b. Références associées : PMID:30643019, PMID:624565, PMID:6554279
• Le fragment Bb activé clive les protéines C3 et C5, produisant les anaphylatoxines C3a et C5a ainsi que l’opsonine C3b ; cela amplifie l’activation du complément et établit un lien avec l’immunité innée et adaptative.
• Le CFB participe également à la prolifération et à la différenciation des lymphocytes B, à l’étalement des monocytes et à la blastogenèse des lymphocytes, mettant en évidence ses rôles immunomodulateurs au-delà de la cascade du complément.
• La protéine contient des domaines sushi (CCP), un domaine de sérine protéase et est une glycoprotéine présentant des ponts disulfure ; elle est sécrétée et peut être présente à la surface des cellules.
• Sur le plan clinique, les mutations du CFB sont associées à la dégénérescence maculaire liée à l’âge (ARMD14) et au syndrome hémolytique et urémique atypique (AHUS4), ce qui souligne son importance dans l’homéostasie immunitaire oculaire et rénale.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L’immunogène correspond aux acides aminés 400 à 500 (NP_001701.2), situés dans le fragment Bb (domaine catalytique). Cet anticorps peut détecter à la fois le proenzyme de pleine longueur et le fragment Bb activé, ce qui le rend adapté au suivi de l’activation du CFB.
• Pour le Western blot (WB), une bande située autour de 86 kDa est attendue pour le CFB de pleine longueur dans les échantillons humains et murins ; valider dans du sérum ou des modèles cellulaires stimulés par le complément.
• Pour l’immunofluorescence/ICC, envisager des méthodes de fixation qui préservent les protéines sécrétées et de surface cellulaire ; la colocalisation avec les composants du complément peut nécessiter une optimisation minutieuse.
• Pour les applications ELISA, utiliser des contrôles positifs appropriés (par exemple, du CFB recombinant ou du sérum de complément activé) et inclure des contrôles négatifs adéquats afin de garantir la spécificité.

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