Anticorps monoclonal de lapin anti-C4A du complément pour WB, IF-P, ELISA - P0C0L4

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du C4-A du complément

• Le C4-A du complément est un composant non enzymatique des voies du complément classique, des lectines et GZMK. Il sert de précurseur activé par protéolyse pour participer à la défense immunitaire innée.
• Après clivage par les protéases du complément comme C1S, MASP2 ou GZMK, il génère le fragment C4b qui se lie de manière covalente à la surface des pathogènes, agissant comme opsonine pour marquer les antigènes en vue de leur élimination. Références associées : PMID : 8538770 PMID : 27738201
• C4b recrute ensuite le C2b du complément pour former les C3 et C5 convertases, qui clivent et activent C3 et C5, propageant la cascade du complément. Références associées : PMID : 12878586 PMID : 18204047 PMID : 2387864
• Le fragment C4a, libéré lors de l'activation, est structurellement similaire aux anaphylatoxines ; cependant son rôle reste incertain et les rapports antérieurs attribuant une fonction de médiateur inflammatoire pourraient être dus à une contamination. Références associées : PMID : 6167582 PMID : 25659340
• Le C4-A du complément est principalement sécrété par les hépatocytes, avec une expression maximale dans le foie ; une synthèse extrahépatique dans des tissus comme la glande surrénale, la thyroïde et le rein contribue à la protection immunitaire locale. Références associées : PMID : 11367523
• Au niveau sous-cellulaire, il est sécrété dans l'espace extracellulaire, et se localise également au niveau des synapses, des axones neuronaux, des dendrites et des surfaces cellulaires.
• La protéine subit plusieurs modifications post-traductionnelles : formation de ponts disulfure, glycosylation, phosphorylation et sulfation, et contient une liaison thioester réactive essentielle pour sa fixation covalente aux surfaces cibles.
• Il est associé à des variants pathologiques du lupus érythémateux systémique et porte des déterminants antigéniques des groupes sanguins ; plusieurs isoformes existent du fait de l'épissage alternatif.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène correspond à un fragment C-terminal (aa 940-1237), qui peut conférer une spécificité pour l'isoforme ; cependant, la réactivité croisée avec le C4B très homologue doit être vérifiée expérimentalement.
• Pour le Western blotting, utilisez des gels de polyacrylamide à faible pourcentage et des temps de transfert prolongés pour séparer et transférer efficacement la cible de haut poids moléculaire (~ 193 kDa).
• En immunofluorescence (IF-P), puisque C4A est sécrété et peut se déposer sur les surfaces cellulaires, optimisez les conditions de fixation et de perméabilisation pour détecter à la fois la protéine intracellulaire et celle liée à la surface.
• Pour l'ELISA, cet anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; associez-le à un autre clone ciblant un épitope non chevauchant pour développer un ELISA sandwich.
• L'activation du complément pouvant consommer C4, tenez compte des conditions de manipulation et de stockage des échantillons pour préserver les niveaux de protéine native.

CamelBio : Votre pont d'approvisionnement tout-en-un

CamelBio propose une sélection complète de matières premières pour le diagnostic in vitro, y compris des paires d'anticorps validées et des protéines recombinantes pour les études de la voie du complément. Cet anticorps monoclonal anti-C4A du complément fait partie de notre portefeuille conçu pour soutenir le développement de tests diagnostiques, du concept à la clinique. Contactez-nous pour les commandes en gros et l'approvisionnement en anticorps personnalisés.