PolymAb Lapin Anti-Complément C3 pour WB et ELISA - P01024 / P01027

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du Complément C3

• Le Complément C3 est un composant central du système du complément, circulant sous forme de protéine précurseur qui est clivée protéolytiquement en fragments fonctionnels (C3a, C3b) lors de l'activation.
• Le C3b, généré par le clivage de la C3 convertase, se fixe de manière covalente aux surfaces des pathogènes via une liaison thioester réactive, agissant comme une opsonine pour la phagocytose et formant la C5 convertase pour activer le C5. Références associées : PMID:28264884, PMID:31507604, PMID:3653927, PMID:6903192, PMID:12878586, PMID:18204047, PMID:2387864, PMID:624565, PMID:6554279
• L'anaphylatoxine C3a médie l'inflammation locale en se liant au C3AR1, déclenchant une signalisation par récepteur couplé aux protéines G, et stimulant les mastocytes, les basophiles, les macrophages et les neutrophiles pour qu'ils libèrent des médiateurs inflammatoires et migrent vers les sites d'inflammation. Références associées : PMID:6968751, PMID:37169960, PMID:37852260, PMID:8702752, PMID:23383423, PMID:342601, PMID:5778786
• Outre ses rôles immunitaires, le C3a agit comme une hormone adipogénique (ASP) qui stimule la synthèse des triglycérides et le transport du glucose dans les adipocytes via le C5AR2, régulant le stockage des graisses et la clairance lipidique postprandiale sans activité pro-inflammatoire. Références associées : PMID:10432298, PMID:15833747, PMID:16333141, PMID:11773063, PMID:12540846, PMID:19615750, PMID:37852260
• Le C3 est principalement produit dans le foie et sécrété dans le plasma, mais les adipocytes produisent et libèrent également du C3, établissant un lien entre le complément et le métabolisme.
• La protéine subit de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment des ponts disulfure, une glycosylation, une phosphorylation et un clivage au niveau des résidus basiques pour générer des fragments actifs.
• Les variants génétiques du C3 sont associés à la dégénérescence maculaire liée à l'âge, au syndrome hémolytique et urémique atypique et à d'autres troubles immunitaires, soulignant son importance clinique.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène correspond à la région C-terminale (aa 1364–1663) du C3 humain et murin, couvrant une partie du domaine C345C ; cette région est présente à la fois dans le précurseur intact et dans les fragments C3b/iC3b/C3d.
• Pour le Western blot (WB), envisagez d'utiliser des conditions réductrices pour détecter le précurseur d'environ 186 kDa ou la chaîne alpha d'environ 110 kDa, et validez dans des échantillons pertinents tels que le plasma humain, le sérum ou les hépatocytes cultivés.
• En ELISA, l'anticorps peut être adapté pour capturer ou détecter le C3 natif à partir de fluides biologiques humains, murins ou de rat ; cependant, la dilution optimale et les conditions de tampon doivent être déterminées empiriquement.
• Étant donné que le C3 est abondant et hautement conservé, assurez-vous d'utiliser des contrôles appropriés pour confirmer la spécificité, en particulier lorsque vous travaillez avec des membres proches de la famille des alpha-2-macroglobulines.

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