mAb de lapin anti-collagène XVII/COL17A1 pour WB, IHC-P, ELISA - Q9UMD9

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du collagène XVII/COL17A1

• Le collagène XVII, également connu sous le nom d'antigène de la pemphigoïde bulleuse de 180 kDa (BP180) et d'antigène 2 de la pemphigoïde bulleuse, est codé par le gène COL17A1. Il appartient à la superfamille des collagènes et se caractérise par un domaine transmembranaire et de nombreuses répétitions collagéniques.
• C'est un composant structurel clé des hémidesmosomes, jouant un rôle essentiel dans l'attachement des kératinocytes basaux à la membrane basale sous-jacente, contribuant ainsi à la cohésion dermo-épidermique.
• La protéine subit un clivage protéolytique qui génère un antigène de la maladie IgA linéaire de 120 kDa (LAD-1), qui constitue un composant des filaments d'ancrage et est ciblé par des autoanticorps dans la dermatose bulleuse à IgA linéaire.
• COL17A1 est principalement localisé au niveau des jonctions cellulaires, notamment des hémidesmosomes, et se trouve également sous forme de protéine sécrétée dans la matrice extracellulaire et la membrane basale.
• L'expression tissulaire est majoritairement observée dans les épithéliums pavimenteux stratifiés, notamment la peau, la cornée, la muqueuse buccale, l'œsophage, l'intestin, les canaux collecteurs du rein, l'uretère, la vessie, l'urètre et le thymus ; il est absent dans le poumon, les vaisseaux sanguins, le muscle squelettique et les nerfs.
• Les modifications post-traductionnelles incluent l'hydroxylation, la glycosylation et la phosphorylation ; des liaisons disulfure stabilisent sa structure. Il est également soumis à un épissage alternatif.
• Les mutations de COL17A1 sont associées à l'épidermolyse bulleuse jonctionnelle (EBJ), ce qui souligne son rôle essentiel dans le maintien de l'intégrité épithéliale.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique issu des acides aminés 1300 à 1400 de COL17A1 humain (Q9UMD9), qui se situe dans la région extracellulaire. Prenez cela en compte lors de la conception de vos protocoles de détection pour garantir l'exposition de l'épitope.
• Pour le Western blotting (WB), le poids moléculaire prédit est d'environ 150 kDa ; cependant, des formes traitées (par exemple le fragment LAD-1 de 120 kDa) peuvent également être détectées selon la préparation de l'échantillon et le type de tissu.
• En immunohistochimie (IHC-P), validez l'anticorps sur des tissus témoins positifs tels que la peau ou la cornée humaine, où un marquage hémidesmosomial fort est attendu. Des méthodes de démasquage antigénique peuvent être nécessaires pour obtenir une exposition optimale de l'épitope.
• Étant donné que COL17A1 est une protéine transmembranaire avec des fragments d'ectodomaine sécrétés, utilisez des tampons de lyse et des contrôles appropriés pour différencier la forme complète de la forme clivée dans l'ELISA ou d'autres tests.
• La réactivité croisée est confirmée pour les échantillons humains ; les performances sur d'autres espèces n'ont pas été testées. Validez la spécificité d'espèce si nécessaire.

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