Anticorps Polyclonal Anti-Collagène I/COL1A2 pour WB, IF/ICC, ELISA - P08123

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de la Chaîne Alpha-2(I) du Collagène

• La chaîne alpha-2(I) du collagène est une sous-unité du collagène de type I, le collagène fibrillaire le plus abondant dans le corps humain, assurant la résistance à la traction des tissus conjonctifs.
• Ensemble avec deux chaînes alpha-1(I), elle forme la molécule hétérotrimérique de procollagène de type I, qui subit un traitement protéolytique pour s'assembler en fibrilles de collagène matures.
• Le collagène de type I est un composant structurel majeur de la matrice extracellulaire dans la peau, les os, les tendons, les ligaments et d'autres tissus conjonctifs, où il s'organise en fibrilles qui sont minéralisées avec de l'hydroxyapatite de calcium dans les os.
• La protéine est synthétisée sous forme de préproprotéine avec un peptide signal, et la chaîne mature est sécrétée dans l'espace extracellulaire, contribuant à l'assemblage supramoléculaire des fibres de collagène.
• Expression spécifique aux tissus : fortement exprimée dans le tendon, le ligament et l'os, avec une organisation des fibrilles critique pour les propriétés biomécaniques ; les mutations dans COL1A2 causent l'ostéogenèse imparfaite et le syndrome d'Ehlers-Danlos.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent l'hydroxylation des résidus proline et lysine, la glycosylation et la formation de ponts disulfures, qui sont essentiels pour la stabilité de l'hélice triple et le réticulation des fibrilles.
• La protéine contient un grand domaine triple hélicoïdal avec des répétitions caractéristiques Gly-X-Y, où X est souvent de la proline et Y est souvent de l'hydroxyproline, et joue un rôle dans l'adhésion cellulaire via des sites de liaison aux intégrines.

Conseils Expérimentaux et Techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique de la région C-terminale (aa 1161-1260) du COL1A2 humain, qui peut reconnaître à la fois la forme pro et le collagène mature ; validez dans votre système d'échantillonnage.
• Pour le Western blot, utilisez des conditions SDS-PAGE réductrices pour dissocier les trimères de collagène ; notez que le poids moléculaire théorique de la chaîne pro-alpha-2 est d'environ 129 kDa, mais les formes matures traitées peuvent apparaître plus petites.
• Lors de la réalisation d'immunofluorescence (IF/ICC), tenez compte du fait que le collagène est sécrété ; si vous colorez le procollagène intracellulaire, incluez des étapes de perméabilisation et co-localisez avec des marqueurs du RE/Golgi.
• Les applications ELISA peuvent être utilisées pour détecter des fragments de collagène solubles ou du collagène sécrété dans des surnageants de culture cellulaire ; optimisez les conditions de revêtement et de détection pour votre matrice.
• L'anticorps réagit de manière croisée avec la souris et le rat, soutenant les études translationnelles dans des modèles animaux de fibrose, de maladies osseuses et de cicatrisation.

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